MLPA法是由MRC-Holland公司开发和商业化的,该公司提供了各种MLPA试剂盒和分析软件。MLPA法自从提出以来,就受到了许多实验室的欢迎,因为它可以快速、灵敏、准确地检测基因的拷贝数变化和甲基化状态。MLPA法也被用于检测一些与疾病相关的基因或染色体的缺失或扩增,如遗传性乳腺癌、结肠癌、遗传性胃癌、神经母细胞瘤等。
MLPA技术介绍 MLPA(multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA)法是“多重连接依赖探针扩增的技术”的简称,是一种高通量、针对待测核酸中靶序列进行定性和定量分析的检测技术。 MLPA技术可以在单个反应中同时对50个靶基因进行定性和半定量分析的检测方法。其主要步骤包括靶序列DNA变性、探针和靶序列DNA杂交...
MLPA技术是一种基于PCR(聚合酶链式反应)的分子生物学技术,用于检测基因的拷贝数变异和序列变异。它是由荷兰MRC-Holland公司于2002年首次开发并推出的。 MLPA技术的原理相对简单。它利用多个特异性引物对目标DNA序列进行扩增,并使用引物上的两个互补部分通过连接子(ligation probes)连接在一起。连接子包含一个引物序列...
1. MLPA是一种高灵敏度、高特异性、高通量检测技术,操作简便、准确度高、重复性强。2. 可以识别点突变,以及基因的复制/删除,比测序等只能找到点突变的技术有很大的优势。此外,MLPA可以检测到小的基因变化。3. 结果可以在24小时内得到,因为这是一个复杂的反应,它允许快速和有效地收集信息。4. 对MLPA的小...
MLPA技术是一种基于PCR(聚合酶链式反应)的分子生物学技术,用于检测基因的拷贝数变异和序列变异。它是由荷兰MRC-Holland公司于2002年首次开发并推出的。 MLPA技术的原理相对简单。它利用多个特异性引物对目标DNA序列进行扩增,并使用引物上的两个互补部分通过连接子(ligation probes)连接在一起。连接子包含一个引物序列和...
MRC Holland是一家位于荷兰阿姆斯特丹的生物技术公司,成立于1985年。该公司开发了用于检测与疾病相关的DNA拷贝数和甲基化模式的工具,其中MLPA技术是该领域的黄金标准,被广泛用于研究遗传性疾病和肿瘤。他们已经开发了400多种试剂盒,涵盖产前诊断、智力障碍筛查、肿瘤病理学研究等多个领域。MRC Holland产品主要是以MLPA...
MLPA技术工作流程 MLPA工作流程主要包括以下6个步骤: DNA变性→杂交→连接反应→ PCR扩增→片段分离→数据分析 1. DNA变性 将DNA标本放入PCR仪中加热5分钟,使DNA双链解链成单链。 2. 杂交 3. 连接反应 在此需要特别注意的一点是:连接酶特异性很高,即使有1个碱基无法正确匹配,也会...
MLPA技术工作原理是使用一对特异性探针,这些探针可以与目标DNA序列特异性结合。探针由两部分组成:一部分包含PCR引物的序列,另一部分是用于连接的链接序列。探针与目标DNA结合后,通过连接酶将探针连接起来,形成完整的可扩增模板。随后,使用PCR对连接好的探针进行扩增,扩增产物的长度对应于不同的目标序列。通过毛细管...
多重连接依赖式探针扩增技术(MLPA)
甲基化特异MLPA技术(Methylation-Specific MLPA, MS-MLPA)是MLPA技术的一种衍生技术,可用于同时对多个目标的甲基化进行半定量分析。 与常规MLPA探针一样,MS-MLPA探针均由左侧探针和右侧探针组成。除了常规MLPA探针的杂交序列、通用引物识别序列及填充序列之外,MS-MLPA探针还包含甲基化敏感的 HhaI核酸内切酶的酶切位点,...