Mito-cpYFP转基因小鼠脏器氧化还原状态与行为学研究 摘要 大量研究表明,过量的自由基会对机体产生氧化应激损伤,引发一系列疾病,加快衰老。对自由基的追踪方法中,线粒体基质靶向超氧化物指示剂环状排列黄色荧光蛋白探针,Circularlypermutedyellowfluorescentprotein(cpYFP)可以实时显示单个线粒体自发爆发超氧化物的生成的方法较...
方法:应用转基因技术将载有可定位于线粒体内的cpYFP(mitochondria-targeted cpYFP,mito-cpYFP)的载体pRP(Exp)-CAGG>mitocpYFP注射到C57BL/6小鼠的受精卵中,采用PCR及RT-PCR的方法鉴定阳性小鼠,通过荧光观察自由基的分布并辅助鉴定阳性小鼠。结果:PCR、RT-PCR及荧光观察结果表明mito-cpYFP cDNA转基因小鼠构建成功。