本发明提供一种利用mitoCRISPR/Cas9系统编辑异常线粒体DNA的方法及试剂盒,该试剂盒包括用于人类或鱼类等线粒体DNA片段,打靶线粒体gRNA和mitoCRISPR/Cas 9表达系统.mitoCRISPR/Cas 9系统包括线粒体定位信号mNLS和mCas 9蛋白或mCas 9的mRNA及相关表达载体.本发明利用mitoCRISPR/Cas9系统靶向删除人类和鱼类细胞中异常...
植物细胞核基因功能的研究通常借助于基因编辑技术。植物线粒体基因编辑面临两大技术瓶颈:一方面,陆地植物线粒体基因组的稳定遗传转化还未实现;另一方面,基于CRISPR/Cas9的线粒体基因编辑技术尚未在植物中实现同质化编辑。因此,只能选择仅...
例如,基因编辑或核转移技术的发展,通过以新颖的方式转移和组合不同的生物有机体或材料,使创造新的或杂交的生命形式成为可能,例如转基因作物、crispr/cas9 或人-动物嵌合体(布朗2012 年;Chrupek 等人。2012;汉森2013 ; 帕沃内和马蒂内利2015 年)。 其次,生物对象被转移到新的领域或环境中,以便通过生成和使用创新...
基于CRISPR-Cas系统开发的单碱基编辑在治疗基因组点突变引起的遗传疾病方面显示出巨大潜力。碱基编辑器中使用的脱氨酶都是单链DNA脱氨酶,在Cas9和sgRNA的作用下,目标DNA双链中的非靶向链暴露出来,为单链DNA脱氨酶实现有效碱基转换提供了...
作者研究利用PEM-seq方法分析了CRISPR-Cas编辑核基因组后靶向位点的情况,发现在多种CRISPR-Cas编辑酶及Cas9家族变体编辑后,核基因组编辑位点都发生了mtDNA与靶向位点融合的序列(图一A,B)。在编辑后的细胞中mtDNA与核基因组靶向位点融合的事件在每103至105次编辑事件中发生一次,而未编辑的样本几乎没有mt-nuclear DNA...
进一步通过基于全基因组范围CRISPR/Cas9敲除筛选确定了调控这一过程的系列基因。因为线粒体胞吐在病理生理环境中均发生,本研究发现溶酶体依赖的新型线粒体胞吐途径可能具有广泛的生理病理意义。 更重要的是,通过氟桂利嗪处理建立了产生完全去除线粒体的哺乳动物细胞的方法。这种方法与以往Richard Youle教授建立的Park2过...
HH-Ad/AAV-069 pAD-U6-sgRNA-CAS9-T2A-EGFP腺病毒基因编辑质粒 HH-Ad/AAV-068 pAD-Cas9-T2A-EGFP-U6-sgRNA腺病毒基因编辑质粒 HH-gene-006 pMXs-hSOX2 (Plasmid #17218) HH-gene-009 pMXs-hOCT3/4(Plasmid #17217) HH-gene-007 pMXs-hKLF4 (Plasmid #17219) HH-gene-010 pMXs-hc-MYC(Plasmid #172...
该技术通过巧妙结合两种基因编辑工具CRISPR-Cas9和Cas12a,显著提升了细胞谱系追踪的精度和深度,为解析胚胎发育、器官再生及疾病机制提供了全新工具。 02.炎症基因表达调控的新机制——TTP与pre-mRNA的“命运决定” 2025年1月24日,来自维也纳大学的Pavel Kovarik团队在Molecular Cell杂志上发表题为 Cytoplasmic mRNA decay...
2022年12月6日,北京生命科学研究所蒋辉教授团队在Cell Reports上发表相关研究,他们首次构建了靶向线粒体蛋白组的sgRNA敲除文库,通过CRISPR/Cas9高通量筛选发现线粒体嵴结构损伤是诱导mtDNA释放、引发cGAS-STING依赖的IFN-I反应的重要原因。靶向线粒体的CRISPR敲除筛选发现敲除55个基因诱发显著的IFN-I反应。其中,占比最...
gondii: For the CRISPR/Cas9-mediated C-terminal epitope tagging of four mtAP2 proteins, we generated a specific single-guide RNA (sgRNA) to introduce a double-stranded break near the translation stop codon in the 3’UTR. We utilized 59 bp PCR primers with 42 bp homology sequences ...