(7)检查程序,打开仪器盖子,放置八联管,关闭盖子,点击“start run” 2. miRNA加尾法逆转录+通用荧光定量PCR ①逆转录(RT): 将提取的RNA按照试剂盒的体系配置好,该步骤我们只需提供RNA,其余逆转录引物、逆转录酶以及dNTPs包含在Mix中。一管内即可逆转录多个miRNA的cDNA。 ②荧光定量(qPCR):使用通用荧光定量试剂盒...
用户需要自备miRNA专一性的一条PCR上游引物。 组分 规格 加尾和逆转录Mix(含dNTP和ATP) 150μL miRNA-polyA RT引物干粉 1支 E.coli polyA聚合酶和M-MLV逆转录酶混合液 40μL miRNA PCR通用下游引物干粉 1支 2×SYBR PCR MasterMix 1mL 超纯水 1mL保存:-20℃,有效期1年。本试剂盒足够25次20μL体系的加...
中文名称:miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒 纯度:99.9% 备注:25次/2997 上海泽叶生物科技有限公司 联系电话: 021-61998551 13122364865 产品介绍: 中文名称:miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒 纯度:99.99% 备注:miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒现货 25次/2997 最新发布供应信息 miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒￥2997次...
PCR反应的效率 PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线。PCR效率取决于实验、反应混合液性能和样品质量。一般说来,反应效率在90-110%之间都是可以接受的。 3. 如何评估实时定量PCR反应的效果 PCR扩增效率:为了正确地评...
2. miRNA加尾法逆转录+通用荧光定量PCR ①逆转录(RT): 将提取的RNA按照试剂盒的体系配置好,该步骤我们只需提供RNA,其余逆转录引物、逆转录酶以及dNTPs包含在Mix中。一管内即可逆转录多个miRNA的cDNA。 ②荧光定量(qPCR):使用通用荧光定量试剂盒 加尾法的上游引物(正向引物)设计: ...
之前大家熟知的miRNA RT-PCR引物主要有两种类型: 1、Oligod(T)特异的RT引物(QIAGEN产品为主) 由特异序列+(T)20左右+兼并碱基V或VN组成。(所有miRNA可以公用一个Oligod(T)的RT引物,但是RNA在反转录前需要进行末端Poly(A)加尾) 2、茎环状结构的RT引物(ABI产品为主) 由可以自身呈环茎状的特异序列+6到8个miR...
茎环法逆转录使用特殊设计的茎环逆转录引物(Stem-loop RT Primer)进行逆转录,该引物由通用的茎环结构序列和6-8个miRNA 3’端反向互补碱基组成,通用的茎环结构不仅能有效地延长miRNA的逆转录产物长度,同时它自身互补的构象可以避免与其他同源基因结合,减少了非特异性扩增的几率。 末端加A尾法逆转录先由PolyA聚合酶...
上海康朗生物科技有限公司生产的miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒,最新报价:2997元/次,miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒英文名称:运输:低温保存:负20℃有效期:1年货期:1-2天其他:产品介绍:miRNA的qRT-PCR关键字:miRNA
1.3 RT-PCR也被用来检测miRNA前体的表达水平, 其他基于PCR技术检测miRNA的方法有引物延伸法,就是在引物的5 末端加一个特异标记,可以定量测定低丰度的RNA含量;原位杂交技术(CISH,FISH)可以方便的检测miRNA的时空表达的差异。 1.4 芯片(microarrays)技术[46,47]是一种较快的研究miRNA表达的方法。
本试剂盒采用SYBR Green I 嵌合荧光染料法的原理来进行miRNA荧光定量PCR检测。本产品是专门为miRNA定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR检测试剂。2×miRNA qPCR Mix包含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂等所有PCR所需要的成分。miRNA qPCR Mix中所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有...