锐博生物>产品与服务索引>miRNA功能试剂>miRNA mimics micrON™ miRNA mimic 是运用化学方法合成的miRNA 模拟物,能模拟细胞中成熟miRNA 的高水平表达,以增强内源miRNA 的调控作用,用于功能获得性(gain-of-function)研究。miRNA mimic 是一种简单高效的miRNA 研究工具,只需用转染试剂包裹即可转染进入细胞,无需构建载体...
非特异性相互作用:有时,miRNA转染可能引起逆向效应,即miRNA mimic与其他基因或信号通路发生非特异性相互作用,导致靶基因的表达发生变化。这种非特异性相互作用可能在不同细胞中表现出不同的程度和模式,从而导致转染结果的差异。 综上所述,不同细胞瞬时转染miRNA mimics后产生不一样的结果是多种因素共同作用的结果。为...
合成miRNA mimics 使用Mirbase网站查询获得miRNA成熟体序列，合成miRNA mimics。扩增目的片段 载体构建 转染组别设置 第1、2组可说明miRNA与靶基因是否存在结合，第3、4组则可说明突变序列是否是miRNA与靶基因的结合位点。每组设置3个平行。同时设置空白对照，即不转染质粒和miRNA mimics，只有细胞样本和转染试剂的空白组。
1. miRNA模拟物(miRNA mimics) 定义:miRNA模拟物是一种合成的小RNA分子,通常设计为双链结构,模仿内源性 miRNA的功能。当转染到细胞中时,miRNA mimics能够模拟特定miRNA的功能, 增强其在细胞内的基因沉默效果。 设计与结构: 双链结构:miRNA模拟物由两条互补的RNA链组成,正义链与内源性miRNA的序 列相同,反义链...
Transfection of microRNA (miRNA) mimics is increasingly being used to examine biological effects of specific miRNAs on cell function. For these gain-of-function experiments, use the Pre-miR™ miRNA Starter Kit to optimize miRNA mimic transfection into cultured ...
图3. miRNA mimics 诱导基因沉默[1] a. miRNA mimics 的两种结合模式:完全互补的 miRNA 与 AGO2 相互作用 (左);部分种子匹配的 miRNA 与 AGO1、3、4 相互作用 (右);miRNA 模拟物引导链 (红色), 乘客链(紫色); 内源性 miRNA 引导链(蓝色)和乘...
miRNA一般可以直接通过合成miRNA 对应的模拟物mimics即可，不需要再另外构建载体 4. 细胞转染 将荧光素酶报告质粒与内参质粒和Mimics共转染细胞，由于内参的启动子活性较强，通常报告质粒与内参质粒的转染比例为10：1，Mimics的使用终浓度是100nM。如果报告质粒载体用的psiCHECK™-2，该载体上已经有内参基因，不需要再...
验证miRNA与mRNA/lncRNA/circRNA的互作,将要研究的靶点序列(序列可以是mRNA的3’UTR,也可以是lncRNA/circRNA序列)插入到报告载体中,作为海肾双萤光素酶的3’UTR,与miRNA的mimics共同转染细胞,最后使用酶标仪检测。 图1 pisCHECK2结构图 图2 miRNA与靶基因互作双萤光素酶系统原理示意图...
miRNA mimics 产品使用手册 规格:1OD*2 (对照为 0.5OD) 纯化方式:HPLC 纯化产品形式:干粉 贮存条件:在-20℃ 或者-80℃ 保存期:1 年,在-20℃或者-80℃ 质量控制:PAGE 检测确定产品是准确分子量大小双链的 miRNA HPLC 纯化并分析双链的 miRNA mimics.纯度>95% 注意事项 miRNA mimics 在操作过程,如果...
通过对转染miRNA mimics和mimics 阴性对照的细胞中mRNA靶基因进行western Blotting和实时荧光定量RCR检测,能够检测靶基因蛋白的表达水平,验证miRNA与靶基因之间的调控关系。 miRNA 3’UTR靶位点验证分析 将预测的miRNA 3’UTR结合靶位点构建到质粒上,并将miRNA mimics和质粒共转染细胞,miRNA mimics阴性对照作为参照,miRNA ...