（2）转染：16h左右细胞约70%时转染萤光素酶报告基因质粒，每个样品设置3个复孔。首先设计四组：空白组（转染试剂+细胞）质粒组 质粒+miRNA NC组 质粒+miRNA mimics组 ● 配制质粒组：按照每空50ng质粒，同时每孔20ul无血清培养基计算需用量，标记为A。● 配制miRNA NC/mimics：miRNA NC/mimics的终浓度为20nM...
miRNA靶基因验证 autumn 12 人赞同了该文章 一、样品准备: 1、质粒转染细胞 (1)细胞铺板:将细胞按50%的密度接种到细胞培养12孔板内。 (2)转染:16h左右细胞约70%时转染萤光素酶报告基因质粒,每个样品设置3个复孔。首先设计四组: 空白组(转染试剂+细胞) 质粒组 质粒+miRNA NC组 质粒+miRNA mimics组 ● 配...
1、在网页在线搜索https://www.targetscan.org/vert_80/, 进入在线预测网站如图1所示,网站首页包括所预测miRNA的所属物种,筛选的限定选项等;另外通过这个网站我们还以根据已知的靶基因来预测未知的miRNA的结合位点,即输入需要预测的基因名或者输入ENST编号,将显示预测该基因的所有miRNA位点。 图1 TargetScan首页 2、这...
鉴于此,去年人们开始使用一种新型的大规模验证方法,即在硅片上进行microRNA靶基因验证的“湿试验(真正的试验而不是用计算机模拟的“干”试验)”。 由于采用了这种方法,研究人员在2008年取得了一系列的成果。Nikolaus Rajewsky小组和David Bartel小组都各自独立地将蛋白质组学与分子生物技术结合在一起,使用定量质谱检测...
《mirna靶基因验证方法》篇1 miRNA靶基因验证方法通常包括以下步骤：1.预测miRNA的靶基因：使用现有的数据库（如Tarbase、miRWalk、TargetScan、miRanda、RNAhybrid、TargetFinder、miRcode、miRDB、RNA22等）来预测miRNA的靶基因。这些数据库可以根据miRNA的序列信息和基因组信息，预测miRNA可能的靶基因。2.实验验证：使用...
miRNA对靶基因功能的调控,是利用荧光素酶报告基因检测试验寻找或验证miRNA对靶基因的调控作用,为客户寻找或验证miRNA的靶基因。 检测方法 示例 miR-21与PDCD4靶向验证 细胞生物学 分子生物学 形态病理学 动物模型 『从“课题设计”到“文章发表” 我们会出现在您...
服务简介:MicroRNA (miRNA)是从真核基因组转录形成的非编码单链小分子RNA。它们的序列高度保守,长度通常是21到23个核苷酸。近来研究发现miRNA几乎与所有细胞的功能和生物体生命过程有关。它们通过靶定到mRNA3'非翻译区(3'UTR)来调节基因的表达。microRNA所调节基因的表达失调与癌症、心血管疾病等各种疾病有关。
miRNA与靶基因的互作实验验证方法主要包括以下几种：双荧光素酶报告基因系统：该方法通过构建含有miRNA靶标位点的Luciferase报告基因载体，并将其转染至细胞中，然后共转染miRNA和Luciferase报告基因载体。miRNA结合到靶基因的3'UTR区域，可能会导致Luciferase基因表达抑制，进而通过测量Luciferase活性来确定miRNA和靶...
miRNA与靶基因验证 价格: 在线询价 查看商家电话 服务描述 服务简介 当miRNAs与靶基因的3’UTR结合后,可以抑制mRNA的翻译或者对标靶mRNA的降解,虽可以利用RT-PCR技术和Western Blot检测,但是都不能有效说明是miRNAs与靶标直接作用。miRNAs与靶标基因相互作用,直接证据在利用双荧光素酶报告基因检测。将miRNA靶基因的3...
答案 请问miRNA靶基因验证时怎么突变靶基因的3‘UTR结合位点 - 分子...例如:靶基因和miRNA的结合位点序列为:CAUUUCA,那应该怎么突变,不知道是突变其中一个还是几个碱基.看文献有的只突变1个碱基,有的突变2个碱基,不知道有没有什么相关推荐 1miRNA靶基因验证时怎么突变靶基因的3‘UTR结合位点 反馈...