miRNA(microRNA)分子序列较小,仅20nt左右,没有真核生物特有的Poly(A)尾巴结构,采用传统Oligo dT引物和随机引物很难获得从miRNA到cDNA的逆转录产物。目前普遍采用两种解决方案:茎环法逆转录和末端加A尾法逆转录(图1),经过这两种逆转录处理之后,得到的cDNA长度从原始的20nt增加到60nt以上,从而实现miRNA的qPCR扩增。