表达shRNA常用的polⅢ型启动子有U6和H1，由于构建序列较短，shRNA能够轻易的插入病毒载体，但是想实现特定组织中的基因沉默，少不了组织特异性启动子的助力，然而U6和H1并不具有组织特异性。基于miRNA骨架的shRNA干扰载体，采用了pol II型启动子(包括多种组织特异性启动子)驱动，从而实现特定组织中的基因沉默
图4. 基于miR30结构的shRNA载体 02Mir30干扰结构的优势分析 （1）启动子选择性多：基于miR30的shRNA可以通过多种pol II启动子转录，包括CMV、CAG、诱导型启动子和组织特异性启动子等，尤其是组织特异性启动子，在这类启动子的作用下，利用miR30结构实现的基因敲低往往只限于某些特定的组织或器官，同时表现出发育...
shRNAmir30简介 shRNA一般由聚合酶III型启动子(如U6)来启动,无法满足我们对特定组织中基因调控的需求,根据miRNA的作用机制,科研人员研发了基于miRNA结构的shRNA干扰载体,其中shRNAmir30载体应用较为广泛,该载体保持了miRNA的loop环和双臂,模拟了体内miRNA实现RNAi的过程,可以更有效的对目的基因进行敲低,同时shRNA...
RNA干扰 (RNAi)是一种进化上保守的转录后基因调控机制,它是由双链RNA(dsRNA)诱发同源mRNA高效特异性降解从而抑制基因表达的现象,是研究基因功能常用的手段之一。用于诱导持续的RNAi的手段,是用pol III型启动子表达shRNA,常用的pol III型启动子有U6和H1,由于构建序列较短,shRNA能够轻易地插入病毒载体,但是要想实现...
哺乳动物 miR30 - shRNA 干扰载体质粒载体结合了 miR30 结构特点与 shRNA 干扰技术,为基因沉默研究提供了一种高效且特异的工具。该载体构建时以 miR30 为骨架进行设计。在启动子方面,常采用具有广泛适用性的启动子如 CMV 启动子或 U6 启动子来驱动基于 miR30 结构改造的 shRNA 转录。miR30 - shRNA 的序列...
慢病毒miR30 shRNA干扰载体系统是用于多种哺乳动物细胞中,高效干扰靶基因表达的方法。当病毒基因组被逆转录并永久整合到宿主细胞基因组时,用户定制的启动子会驱动包含目的基因和一个或多个基于miR30的靶向目的基因的shRNA(shRNAmiR)多顺反子的表达。 shRNAmiR转录物通过胞内micro-RNA途径加工产生成熟的shRNA,促进...
当载体进入细胞后,反义寡核苷酸可以与 miR-30 结合。也可以构建表达短发夹 RNA(shRNA)的载体,shRNA 进入细胞后会被加工成与 miR-30 互补的小干扰 RNA(siRNA) ,从而发挥干扰作用。 导入细胞。 构建好的干扰载体需要被导入目标细胞中。这一过程可以通过多种方法实现,使用脂质体转染试剂将载体包裹,形成脂质体-...
图2 基于miR30结构的shRNA载体 Mir30结构的优势 （1）启动子选择性多：基于miR30的shRNA可以通过多种pol II启动子转录，包括CMV、CAG和特异性启动子等。（2）可与报告基因共表达：报告基因与shRNA共表达，方便检测shRNA的转录。案例分享 安徽医科大学的王学富教授在题为“G protein-coupled receptor 35 attenuates...
组织特异性干扰神器—..shRNAmir30简介shRNA一般由聚合酶III型启动子(如U6)来启动,无法满足我们对特定组织中基因调控的需求,根据miRNA的作用机制,科研人员研发了基于miRNA结构的shRNA干扰载体,其
RNA干扰 (RNAi)是一种进化上保守的转录后基因调控机制,它是由双链RNA(dsRNA)诱发同源mRNA高效特异性降解从而抑制基因表达的现象,是研究基因功能常用的手段之一。用于诱导持续的RNAi的手段,是用pol III型启动子表达shRNA,常用的pol III型启动子有U6和H1,由于构建序列较短,shRNA能够轻易地插入病毒载体,但是要想实现...