上下游引物各0.5µM;5ng/µLcDNA;SYBR染料, 10µL;最后使用DEPC水将体系补齐至20µL。 反应体系为:首先,95℃反应5min,然后进行40个反应循环(94℃15s, 60℃15s,72℃30s)。以GAPDH作为内参,使用2-△△CT方法计算mRNA 的相对表达量。本试验使用的引物序列如表2.1 表1.1本部分使用的引物序列表 Table...
Part C 为指标的特异性引物试剂盒,试剂盒包括进行qPCR的上下游引物,以及逆转录使用的特异性茎环引物,该部分可以单独购买; 另试剂盒中提供一支RNA 酶DNA 酶free的双蒸水,可用于360次体系的配制。 本试剂盒目前订购,还可赠送内参的特异性引物试剂盒,该试剂盒包括检测该内参的qPCR上下游引物,以及逆转录使用的特异...
BMPR2的3’-UTR突变 引物,扩增产物连接到双酶切后的pGL3-ccdb载体,连接后 转化酶切鉴定后进行测序分析 1.5BMPR2蛋白表达检测 采用Westernblot法进行蛋白检测。4%～10%的预制胶 电泳分离蛋白质,经湿转法将蛋白转移至硝酸纤维素膜上, 一抗4℃摇床孵育过夜,用TotallabTL100图像分析软件对 特异条带进行灰度扫描,...
血清/血浆miRNA提取分离试剂盒(目录号:DP503),血浆miRNA反转录试剂盒(目录号:KR211),miRNA实时荧光定量检测试剂盒(SYBR Green)(目录号:FP411),外参(目录号:CR100-01),RT-PCR扩增引物PCR上游引物Has-miR-21-5p(目录号:CD201-0092),外参上游引物(目录号:CD201),以上产品均购买自天根生化科技(北京)有限公司。
抑制miR-21-5p表达通过靶向FOXP2调控肺癌细胞增殖和凋亡
20 μl cDNA使用10 μl 2×通用型SYBR Green预混液、0.4 μl 10×通用引物,0.4 μl 10×特异引物进行检测,程序如下:95 ℃ 15 min,1个循环;94 ℃ 15 s,55 ℃ 30 s,70 ℃ 30 s(荧光收集阶段),40个循环。每个cDN...
(RT-qPCR)试剂盒均购自广州锐博生物技术有限公司,EXO RNA提取试剂盒购自北京全式金生物技术股份有限公司,Trizol试剂购自广州瑞真生物技术有限公司,PCR所需引物购自生工生物工程(上海)股份有限公司,lipofectamine 2000试剂、蛋白免疫印迹法相关试剂及BCA蛋白定量试剂盒均购自美国ThermoFisher公司,磷酸化丝裂原和应激激活...
目的:检测原发性肝癌患者血清中miR-21和miR-1247-5p表达水平的变化,探讨miR-21和miR-1247-5p在原发性肝癌中筛查以及诊断的意义.方法:收集临床确诊为原发性肝癌患者的血清样本41例,并且收集同时期的健康体检人群血清样本41例,提取血清中的miRNA,利用相应特异的颈环反转录引物,反转录成cDNA,同时构建内参U6,以及m...
Part C 为指标的特异性引物试剂盒,试剂盒包括进行qPCR的上下游引物,以及逆转录使用的特异性茎环引物,该部分可以单独购买; 另试剂盒中提供一支RNA 酶DNA 酶free的双蒸水,可用于360次体系的配制。 本试剂盒目前订购,还可赠送内参的特异性引物试剂盒,该试剂盒包括检测该内参的qPCR上下游引物,以及逆转录使用的特异...
Part C 为指标的特异性引物试剂盒,试剂盒包括进行qPCR的上下游引物,以及逆转录使用的特异性茎环引物,该部分可以单独购买; 另试剂盒中提供一支RNA 酶DNA 酶free的双蒸水,可用于360次体系的配制。 本试剂盒目前订购,还可赠送内参的特异性引物试剂盒,该试剂盒包括检测该内参的qPCR上下游引物,以及逆转录使用的特异...