为进一步提高检测性能,李诚予副教授继续在上述工作的基础上引入基于DNA Walkers的信号放大策略,成功实现了对miRNA-21序列的超高灵敏分析。该工作在发光限域型上转换纳米颗粒表面利用Nicking exonucleas作为引发器,实现了一种三维DNA Walkers,并结合光镊技术,使得检测灵敏度提升至69 aM。该方法不仅可在单细胞水平上准确定量...
microRNAs(miRNA)是一种大小约21-23个碱基的单链小分子RNA，是360问答由具有发夹结构的约70-90个碱基...
MicroRNA(miRNA)是一类21-23个碱基的小RNA序列,广泛存在于动物、植物、真菌及病毒的基因组中,调控生物体的生长发育等过程。其前体大约有70-100个碱基,形成标准的stem结构,加工后成为小型的单链RNA。miRNA通过与mRNA结合,让这段互补的mRNA序列沉默或降解。现在热门的RNA干扰技术就是利用了这个细胞内机制,加入miRNA的...
TaqMan荧光定量PCR与这些技术相比,有着明显的优点,由于有些肿瘤可转录特异性mRNA,但无相应蛋白合成,故荧光定量PCR应用范围较蛋白广泛;另外只要知道待测基因序列,即可设计合成引物探针进行逆转录及扩增,操作方便;同时该方法具有较高的灵敏度及可重复性,保证了医学检测结果的准确性。 以microRNA21(MIR21)检测为例,micro...
个别microRNA基因的种子区域较短,因此其序列被随机突变改变的可能性较小。然而,已知某些种子序列的突变与疾病相关。例如,miRNA-96的突变与渐进性听力丧失有关(Mencía等,2009;Soldà等,2012),miRNA-184的突变导致EDICT综合征,这是一种罕见的眼部疾病,表现为虹膜发育不全、角膜内皮营养不良和先天性白内障(Hughes等,201...
miRNA的作用机制:miRNA的功能属于转录后修饰调控,主要通过和mRNA的3’UTR区进行结合(3’UTR区是非翻译区域,位于成熟mRNA的5'端和3'端,不编码蛋白质,但具有翻译调控功能,并参与调节mRNA的稳定性和细胞内定位,如图),结合区域称之为seed,...
在约2300种已知的人类成熟microRNA中,Patho-DBiT在MALT切片中检测到了1352种microRNA,其映射序列的长度峰值为21个核苷酸,与此类小RNA的已知长度完全一致。通过对肿瘤区域和非肿瘤区域的microRNA进行差异表达分析,研究人员在空间上绘制了microRNA在肿瘤发生中的调控网络。
它们监控基因表达,并在许多目标调控序列中调节蛋白质合成。这些微RNA的调控程序失调已被证实会促进肿瘤的形成和发展。因为miRNA可以调节多种基因调控程序,它们在多种肿瘤特征的出现中发挥着重要作用。最近的证据还表明,它们可能会在肿瘤微环境中抑制免疫应答。此外,研究也证实了miRNA在多种癌症的药物抗性中起作用。在...
这个来自 lin-4 的小 RNA 似乎负调控 lin-14 蛋白的表达水平。此后,Victor Ambros 和 Gary Ruvkun 进一步发现 lin-4 miRNA 通过结合 lin-14 mRNA 中的互补序列来阻断 lin-14 蛋白的表达[2]。 图2. miRNA 的发现[3]。 A. 秀丽隐杆线虫是了解细胞发育的模式生物。B. Ambros 和 Ruvkun 研究了 lin-4 ...