microRNAs（miRNA）是一种大小约21-23个碱基的单链小分子RNA，是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（双链），但是和siRNA密切相关。据推测，这些非编码小分子RNA（miRNA）参与调控基因表达，但其机制区别于siRNA接到的mRNA降解。第一个被确认的miRNA是...
为进一步提高检测性能,李诚予副教授继续在上述工作的基础上引入基于DNA Walkers的信号放大策略,成功实现了对miRNA-21序列的超高灵敏分析。该工作在发光限域型上转换纳米颗粒表面利用Nicking exonucleas作为引发器,实现了一种三维DNA Walkers,并结合光镊技术,使得检测灵敏度提升至69 aM。该方法不仅可在单细胞水平上准确定量...
TaqMan荧光定量PCR与这些技术相比,有着明显的优点,由于有些肿瘤可转录特异性mRNA,但无相应蛋白合成,故荧光定量PCR应用范围较蛋白广泛;另外只要知道待测基因序列,即可设计合成引物探针进行逆转录及扩增,操作方便;同时该方法具有较高的灵敏度及可重复性,保证了医学检测结果的准确性。 以microRNA21(MIR21)检测为例,micro...
MicroRNA(miRNA)是一类21-23个碱基的小RNA序列,广泛存在于动物、植物、真菌及病毒的基因组中,调控生物体的生长发育等过程。其前体大约有70-100个碱基,形成标准的stem结构,加工后成为小型的单链RNA。miRNA通过与mRNA结合,让这段互补的mRNA序列沉默或降解。现在热门的RNA干扰技术就是利用了这个细胞内机制,加入miRNA的...
个别microRNA基因的种子区域较短,因此其序列被随机突变改变的可能性较小。然而,已知某些种子序列的突变与疾病相关。例如,miRNA-96的突变与渐进性听力丧失有关(Mencía等,2009;Soldà等,2012),miRNA-184的突变导致EDICT综合征,这是一种罕见的眼部疾病,表现为虹膜发育不全、角膜内皮营养不良和先天性白内障(Hughes等,201...
以microRNA为例，下图展示了microRNA结合调控靶基因mRNA的命运受到多种顺式和反式作用元件的影响，包括mRNA自身的5‘和3’非翻译序列以及细胞类型特异的一些调控[46]。microRNA调控方式和作用也非常复杂，可能通过促进靶基因mRNA降解或者抑制其翻译来实现调控。甚至有研究认为microRNA可以促进mRNA表达水平上调[47]。因此...
miRNA-seq是为了检测miRNA的表达情况发展起来的高通量测序方法。由于miRNA的序列很短，因此建库时可以直接添加接头，进行逆转录扩增，通过PCR扩增并添加测序接头，然后纯化特定范围的DNA片段，进行上机测序，结合数据分析可以了解miRNA的表达情况（图4）。图4 miRNA测序实验流程图。文献案例 2023年6月，Wang等人在Frontiers ...
miRNA的作用机制:miRNA的功能属于转录后修饰调控,主要通过和mRNA的3’UTR区进行结合(3’UTR区是非翻译区域,位于成熟mRNA的5'端和3'端,不编码蛋白质,但具有翻译调控功能,并参与调节mRNA的稳定性和细胞内定位,如图),结合区域称之为seed,...
它们监控基因表达,并在许多目标调控序列中调节蛋白质合成。这些微RNA的调控程序失调已被证实会促进肿瘤的形成和发展。因为miRNA可以调节多种基因调控程序,它们在多种肿瘤特征的出现中发挥着重要作用。最近的证据还表明,它们可能会在肿瘤微环境中抑制免疫应答。此外,研究也证实了miRNA在多种癌症的药物抗性中起作用。在...