Mg2+浓度 Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。 Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。
Mg2+浓度过低时,酶活力显著降低;过高时,通常会导致非特异性扩增产物的累积。PCR混合物中的DNA模板,引物和dNTp 的磷酸基团均可与Mg2+结合,降低Mg2+实际浓度。因为Taq DNA聚合酶需要的是游离Mg2+。
Mg2+浓度越高,聚合酶活性越强,过强就会出现非特异性扩增!Mg2+浓度越低,聚合酶活性越低,扩增效率也就越低,产物就越少!=== 所以PCR扩增实验,需要根据实际情况,摸索适宜的Mg2+浓度!
在PCR中,标准的 Mg2+ 终浓度范围为1–4 mM,建议优化滴定增量为0.5 mM。 Mg2+ 浓度过低会降低聚合酶活性,导致PCR产物较少或无PCR产物。另一方面, Mg2+ 浓度过高则会提高引物-模板复合物的稳定性,产生非特异性PCR产物,并增加由dNTP错误插入导致的复制错误(图9) 图9.使用不同浓度的MgCl2进行PCR扩增。最上方条...
(3)Mg2+浓度过高。 (4)复性时的温度过低等。 例1 下列关于电泳的说法,错误的是( ) A. 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 B. 带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动 C. DNA在琼脂糖凝胶中的迁移速率与凝胶的浓度有关 D. 用琼脂糖凝胶电泳,DNA的电泳迁移速率完全取决于分子的大小 ...
强心甙中毒与下列哪项离子变化有关: A. 心肌细胞内K 浓度过高,Na 浓度过低 B. 心肌细胞内K 浓度过低,Na 浓度过高 C. 心肌细胞内Mg2 浓度过高,Ca2
血清镁(Mg2 ,Mg)是指在人体血液中存在的镁离子的浓度。镁离子在人体中起着重要的生理功能,参与多种酶的活化和抑制,调节神经肌肉的兴奋性,维持心脏的正常收缩节律等。血清镁的浓度对人体健康具有重要影响,过高或过低的血清镁浓度都可能引发一系列的疾病。血清镁(Mg2 ,Mg)
Mg2+浓度 收藏 回复 吧友221.7.162.* 快试试吧,可以对自己使用挽尊卡咯~ ◆ ◆ Mg2+浓度:Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特 异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。 反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul,应用多 ...
在PCR反应体系中,加入一定浓度的Mg的作用是() A保持一定的pH B抑制非特异性扩增 C保持TaqDNA聚合酶的活性 D增加DNA模板的溶解度 E有利于引物和模板的结合 正确答案 答案解析 TaqDNA聚合酶需依赖Mg2+为激活剂,一定浓度的Mg2+可保持TaqDNA聚合酶的活性,过高的Mg2+则会引起非特异性扩增。