方法:用不同浓度的MG-132处理细胞于24小时和48小时后。通过离心收集上清液和单层细胞，固定在含70%乙醇的PBS中，并用吖啶橙染色。将等体积细胞和吖啶橙（5mgml PBS溶液）固定在显微镜玻片上，并通过荧光显微镜进行检测。对于膜联蛋白V分析——通过离心收集细胞并用膜联蛋白V和碘化丙啶染色；对于细胞分析——细胞在...
mg132泛素化处理时间4h。结果用1mmol/LMG-132,在14~18hpi处理4h可以引起早期胚胎发育细胞周期延迟。通过Western Blotting验证在检测12 hpi时总蛋白泛素化水平最高,以此为基准设置不同浓度以及时间梯度,确定MG-132引起2-细胞发育阻滞和延迟的最适浓度和处理时间,最终确定MG-132浓度1 mmol/L,在14~18 hp...
MG132为蛋白酶体抑制剂。 图3中,相对于MG132未处理组中SUBSTRATE蛋白在各时间点无明显变化,MG132处理组中的SUBSTRATE蛋白在2h、4h、8h的水平明显减小。说明SUBSTRATE的降解与蛋白酶体相关。 图3 用CHX和MG132处理细胞,在0h、2h、4h、8h时间点分别收细胞并裂解,用对应的抗体IB检测底物蛋白和内参 E3泛素连接酶能...
实验设计:选一个阳性对照细胞,A549 有wt p53;选一个实验细胞 H1975 有mutant p53 R273H 突变;选一个抑制剂MG132, 10uM。定MG132的作用时间点 0,1,2,3,4,5,6小时 (大部分细胞在MG132 10uM 6小时以后都开始要挂了)。 Day 0. seed A549 cells in 6-well-plate, seed H1975 cells in 6cm dishes...
跟矽肺这样的病是一个道理。
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这个我还真不懂 ♂️