2. 吹打混匀并置于垂直混匀器4℃裂解15min; 3. 按照(一)步骤,纯化回收RNA; (六)RNA 反转录 1. 按照下列组分配制RT反应液(反应液制备请在冰上进行)。为了保证反应液配制的准确性,减少分装造成的误差,应按照比实际用量稍大的体积配制反应液,最后加入RNA样品。 注意:注意反转录步骤RNA投入量按等体积进行,后续...
- 使用protein A/G磁珠结合抗体,通过磁力架分离沉淀物,重复洗涤3次以去除未结合的抗体和杂质。RNA纯化回收步骤:- 加入Trizol裂解液,裂解后按照之前步骤纯化回收RNA。完成RNA提取、片段化和免疫沉淀后,进行RNA反转录。按照实际用量配制反应液,确保准确性,然后按照特定程序进行反转录。定量PCR检测作为实...