与普通的qPCR有所不同,MeRIP-qPCR是验证某个目标基因上的某个修饰位点(以一小段区域的形式,MeRIP法精确不到单碱基)的修饰水平。得到的结果往往是一个%(IP/Input)的数值,它体现的是该位点的修饰水平(目标基因发生该修饰的转录本占该基因总转录本的比例),而普通qPCR验证的是某个基因的表达水平(共表达了多少转录...
图2 SYBR Green法实验原理 qPCR引物设计流程与普通PCR一致,但相较于普通PCR的引物设计原则,qPCR更为严格,具体如下:1. 引物的退火温度要高,一般要在60℃以上;2. 引物的产物大小不要太大,一般在80-250bp之间都可; 3. 对于定量PCR来说,特别是在使用SYBR Green的情况下,引物二聚体的存在对结果的干扰较大,所以...
(1)MeRIP-qPCR不需要内参来进行样本间的均一化矫正 从结果的形式%(IP/Input)我们也可以看到,这个实验侧重看修饰的片段(IP样品qPCR结果)占总片段(Input样品qPCR结果)的比例,实验目的只是要得到这两者的比值就体现修饰水平,因此MeRIP-qPCR不涉及到普通的相对定量qPCR...
什么是qPCR原理?采用这种方法如何来开展研究m6A特定位点的RNA甲基化水平呢? 02:49 m6A RNA甲基化片段富集试剂盒(qPCR版),MeRIP-qPCR版试剂盒,以及MeRIP实验工具 02:50 m6A DNA甲基化定量检测试剂盒(比色法) 01:00 尿液样本 m6A 定量检测试剂盒(比色法) 01:01 m6A RNA甲基化片段富集试剂盒(qPCR版)【MeRIP...
m6AMeRIP实验流程图 m7GMeRIP实验流程图 客户提供 ① 活细胞(≥5×107cell),灌满培养基室温运输,或冻存细胞干冰运输; ②ChIP级抗体; 伯信提供 ① 检测报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论); ②高通量测序结果(MeRIP-Seq); ③qPCR引物(MeRIP-qPCR); ...
6、本试剂盒适配下游RT-qPCR以及特定甲基化的全转录组测序。 第一部分:背景简介RNA转录后修饰RNA修饰开始被认为仅仅是RNA在核酸结构上的化学微调,随着前沿研究技术的发展以及相关抗体的出现,当前发现RNA修饰在转录组水平广泛存在,并且是可逆的动态调控状态,参与生物进程的多方面,包括:细胞分化、性别决定、肿瘤的发生和转...
溪仔尾仔: 基于PrimerBank和NCBI数据库的引物查找与设计---生科三班xhs原创,请勿转载 一、引物数据库查找: 要设计一个mRNA的qPCR引物,首先应该先看看别人是否已经使用过,可以先在数据…阅读全文 赞同325 19 条评论 分享收藏 血管形成实验——原理、步骤、注意事项、示例图 指北针 天津大...
图示 2:使用 m6A RNA 甲基化富集试剂盒(qPCR 版)富集含有 m6A RNA 片段: 采用抗 M6A 抗体(#A-1801)从 10µg 总人类 RNA 和 500ng 阳性对照寡糖中捕获含 有 m6A 的 RNA 片段. 非免疫 IgG 作为阴性对照.. 对富集 RNA 进行纯化,荧 光定量进行富集倍数比较. 图示 1:使用 m6A RNA 甲基化片段富集试剂...
实验原理: MeRIP利用m6A特异性抗体识别并结合mRNA上的m6A甲基化修饰位点,以RNA免疫共沉淀方法富集甲基化修饰片段,同时,结合高通量测序与qPCR,在全转录组范围内研究发生m6A甲基化修饰的RNA区域,及其对基因表达的调控作用。 产品优势: 1.快速省时 2.稳定可靠 ...