经过以上步骤,MC1061F电转感受态制备完成。在LB琼脂平板上观察到形成了菌落,证明电转成功。可以通过PCR、测序等方法验证质粒DNA是否正确导入大肠杆菌。 4. 结论 本实验介绍了MC1061F电转感受态的制备方法。通过将大肠杆菌预培养液与质粒DNA结合,并经过一系列处理和培养步骤,成功导入质粒DNA至大肠杆菌中。这种制备方法是...
9. 此时的感受态细胞可以依照下面的步骤10到16直接进行转化操作,也可以分装,加入甘油后于-70°C冰冻保藏。 10. 向事先灭菌,并经冷处理的1.5ml 聚丙烯管中转移10烧以艺绍燃松统液难0微升感受态细胞悬浮液。向每个转化管中加入DNA(一般含量是10微升或缺乡呼力景乡某扩更低的体积中所含量应不超过50纳克)。细心混...
氯化钙法(Calcium Chloride)本方法适用于批量制备大肠杆菌感受态细胞,所得感受态细胞可以获得5 x 106 到 2x 107 转化克隆/微克超螺旋质粒DNA 材料(MATERIALS)缓冲液和溶液(Buffers and Solutions)(冰冷的)CaCl2•2H2O (1 M)冰冷的MgCl2-CaCl2 s溶液(solution, ice cold)培养基(Media)用...