进行MALDI-TOF-MS分析过程中可优化脉冲激光、模式、加速电压、激光强度等参数,最终获得理想的质谱图。 MALDI-TOF质谱数据分析过程中,需要对得到的谱图进行肽质量指纹谱(PMF)数据库搜索,将数据库中的蛋白序列理论酶切成肽段,计算其理论图谱,与实验图谱进行比对得到结果(扣除基质本底、酶自切和角蛋白污染峰)。 此外,...
图1 某复杂蛋白的MALDI-TOF分子量图谱 图2与图3分别是某重组复杂融合蛋白的ESI Q-TOF 和MALDI-TOF上的质谱图谱。如图2所示,由于样品的高度异质性、复杂糖型修饰以及ESI多电荷的加成,导致完整分子量无法直接在Q-TOF上解析成功。因MALDI-TOF常使蛋白产生单电荷的分子离子等优点,可以成功鉴定复杂修饰的蛋白质,如...
MALDI-TOF 质谱技术是 PMF 的首选,主要是因为 MALDI-TOF 具有一些优势特点。 ( 1 ) 软电离技术(在 MALDI 过程中肽片段能保持完整)。 ( 2 ) 电离方法也适合不同多肽混合物的分析,该方法较耐污染(缓冲液、盐、增塑剂等) 。 ( 3 ) 方法灵敏度高(有 MALDI 过程和 TOF 质量分析仪) 。 ( 4 ) 良好的分...
MALDI-TOF质谱的全称是:基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry )。顾名思义,其原理和鉴定步骤可简要地概括为: ①基质辅助:微生物样本裂解,蛋白与小分子基质溶液充分混合,待溶剂挥发...
MALDI—TOFMS鉴定微生物的标志物主要是特异性保守核糖体蛋白。MALDI—TOFMS基于微生物蛋白指纹图谱的特异性峰谱进行鉴定,只需将细菌涂布于靶板,加入基质溶液裂解,室温干燥后即上机检测,获取的质量图谱与数据库中的标准图谱进行自动对比分析,即可获...
MALDI-TOF质谱技术在多肽、蛋白质、蛋白质组学、药物代谢研究、环境监测、食品质量控制等领域都有广泛的应用,特别是在具有N/O糖基化修饰及PEG化修饰等高度复杂的多肽与蛋白质方面有显著优势。 它可以在完整水平上研究物质的整体相对分子量,结合其他正交分析手段,进一步确认该物质的整体序列分子量是否与预期一致。
进行MALDI-TOF-MS分析过程中可优化脉冲激光、模式、加速电压、激光强度等参数,最终获得理想的质谱图。MALDI-TOF质谱数据分析过程中,需要对得到的谱图进行肽质量指纹谱(PMF)数据库搜索,将数据库中的蛋白序列理论酶切成肽段,计算其理论图谱,与实验图谱进行比对得到结果(扣除基质本底、酶自切和角蛋白污染峰)。此...
微生物的质谱鉴定基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)所生成的蛋白图谱分析开展,这一技术克服了传统生化表型鉴定方法操作复杂、检测时间长、效率低的短板,从技术上提升了临床微生物的检验能力,因此在临床得到了快速的应用。2020年10月,胡继红和丛玉隆发表的《我国临床微生物实验室现状与分级诊疗下实...
基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF)指纹图谱法是一种微生物分类和鉴定的快速可靠的方法,可广泛应用于临床诊断、环境和分类研究或者食品加工质量控制中。BioTyperTM MALDI-TOF质谱仪指纹图谱法可使研究人员在几分钟内就可鉴定不明细菌、酵母菌和霉菌。
在蛋白质消化后,MALDI-TOF MS也可用于分析获得的肽段,通过肽质量指纹图谱进一步确认一级结构。肽质量指纹图谱(PMF):MALDI-TOF质谱仪操作简单、质量准确度高、分辨率和灵敏度高。因此,它在蛋白质组学中有着广泛的用途,通过一个称为肽质量指纹图谱的方法从简单混合物中鉴定蛋白质,该方法通常与二维凝胶电泳(2...