进行MALDI-TOF-MS分析过程中可优化脉冲激光、模式、加速电压、激光强度等参数,最终获得理想的质谱图。MALDI-TOF质谱数据分析过程中,需要对得到的谱图进行肽质量指纹谱(PMF)数据库搜索,将数据库中的蛋白序列理论酶切成肽段,计算其理论图谱,与实验图谱进行比对得到结果(扣除基质本底、酶自切和角蛋白污染峰)。此...
首先对来自三个国家经RT-PCR检测的362个鼻拭子样本(211个阳性,151个阴性)进行MALDI-TOF MS检测,后分别使用六种机器学习算法对所得谱图进行分析,对不同的机器学习算法进行评估后,支持向量机-径向基核函数(support vector machine with a radial kernel, SVM-R)模型具有最高的诊断准确度(93.9%),区分COVID-19患...
MALDI-TOF MS质谱仪可实现临床对部分微生物传统检测方法的技术替代,通过对未知化合物(菌)所得谱图的分析,进而解析出化合物结构。MALDI-TOF MS快速鉴定经固(液)体培养基短时培养的阳性血培养物中的病原菌,且一次实验可同时多个样本检测,准确...
dNTP)和引物,然后加入一单碱基延伸引物,其3’末端碱基紧挨SNP位点,采用四种ddNTP替代dNTP。这样,探针在SNP位点处仅延伸一个碱基,连接上的ddNTP与SNP位点的等位基因对应。用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 检测延伸产物与未延伸引物间的分子量差异,确定该点处碱基。
MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱, 英文名Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization Time of Flight Mass Spectrometry)是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱,其无论是在理论上还是在设计上都是十分简单和高效的。 电喷雾电离 ( ESI ), 基质辅助激光解吸电离( MALDI) 技术, 和飞行时间质量...
微生物的质谱鉴定基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)所生成的蛋白图谱分析开展,这一技术克服了传统生化表型鉴定方法操作复杂、检测时间长、效率低的短板,从技术上提升了临床微生物的检验能力,因此在临床得到了快速的应用。2020年10月,胡继红和丛玉隆发表的《我国临床微生物实验室现状与分级诊疗下实...
MALDI-TOF MS质谱仪主要由离子源、飞行时间分析器和离子检测器三部分组成。将待检样品与基质液点在金属靶板上,待溶剂完全挥发后二者形成共结晶,利用离子源发射激光照射共结晶薄膜时,基质分子会吸收能量与样品解吸附并使其电离,电离的生物分子在电场作用下加速通过真空飞行管,根据不同带电离子到达检测器的时间及...
MALDI-TOF质谱的全称是:基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry )。顾名思义,其原理和鉴定步骤可简要地概括为: ①基质辅助:微生物样本裂解,蛋白与小分子基质溶液充分混合,待溶剂挥发...
TOF分析器根据m/z分离这些生成的离子,MS软件生成和分析这些离子的谱表征,最终生成MS谱图。MALDI-TOF质谱的应用 完整质量测定:完整的质量测定是蛋白质表征的基础且至关重要,因为一个蛋白质的正确分子量可以指示完整的结构。MALDI是一种软电离技术,适用于通过其他电离方法电离时易碎的蛋白质。MALDI-TOF MS的性能受...