进行MALDI-TOF-MS分析过程中可优化脉冲激光、模式、加速电压、激光强度等参数，最终获得理想的质谱图。MALDI-TOF质谱数据分析过程中，需要对得到的谱图进行肽质量指纹谱（PMF）数据库搜索，将数据库中的蛋白序列理论酶切成肽段，计算其理论图谱，与实验图谱进行比对得到结果（扣除基质本底、酶自切和角蛋白污染峰）。此...
因MALDI-TOF常使蛋白产生单电荷的分子离子等优点，可以成功鉴定复杂修饰的蛋白质，如图3所示，该融合蛋白的MALDI-TOF分子量约88122Da，与预期蛋白质的理论序列分子量一致。图2 某融合蛋白的ESI Q-TOF质谱图谱 图3 某融合蛋白MALDI-TOF的质谱图谱
MALDI-TOF MS质谱仪主要由离子源、飞行时间分析器和离子检测器三部分组成。 将待检样品与基质液点在金属靶板上,待溶剂完全挥发后二者形成共结晶,利用离子源发射激光照射共结晶薄膜时,基质分子会吸收能量与样品解吸附并使其电离,电离的生物分子在电场作用下加速通过真空飞行管,根据不同带电离子到达检测器的时间及离子...
质谱分析数据见表1、表2,产物的数均分子量测定值与厂家采用中国药典方法检测的结果一致,且PEG400中九聚体占比最高。 表1 PEG400的MALDI-TOF MS的测定结果 表2 PEG400的MALDI-TOF MS端基结构分析 图1 PEG400 MAIDL TOF检测图谱 由图1可知PEG400的单体结构为-CH2CH2O-,分子量44.052,样品检测到聚合物离子峰系...
摘要:应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF),以1,8,9-蒽三酚为基质,无阳离子添加剂,对2个厂家的PEG400的结构进行了确认,并对比研究了MALDI-TOF检测方法与中国药典化学法(端基分析法)的结果,实验表明,MALDI-TOF质谱法是分析PEG400数均分子量及其端基结构准确、快速的检测方法。
图2 血平板上5d菌落 图3 革兰染色形态(X1000) 经布鲁克MALDI-TOF MS质谱仪鉴定为:人型支原体,得分2.052,见图4;相对分子质量峰值见图5。 图4 布鲁克MALDI-TOF MS质谱仪鉴定得分 图5 相对分子质量峰质谱图 案例分析 患者行左肾经皮肾镜碎石、取石+左侧输尿管内支架置入术后,反复发热,白细胞一直在参考值以上...
MALDI-TOF质谱可以分析多种生物分子,如肽、蛋白质、碳水化合物、寡核苷酸等。由于形成的离子具有较低的内能,MALDI-TOF的一大优点是,软电离过程可以观察电离的分子,而分析物几乎不破碎,允许分析物的分子离子被识别,即使是在混合物中。该系统使用方便,维护方便,数据采集速度快。选择合适的基质物质是MALDI-TOF质谱成功的...
摘要:应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF),以1,8,9-蒽三酚为基质,无阳离子添加剂,对2个厂家的PEG400的结构进行了确认,并对比研究了MALDI-TOF检测方法与中国药典化学法(端基分析法)的结果,实验表明,MALDI-TOF质谱法是分析PEG400数均分子量及其端基结构准确、快速的检测方法。
MALDI-TOF质谱技术在多肽、蛋白质、蛋白质组学、药物代谢研究、环境监测、食品质量控制等领域都有广泛的应用,特别是在具有N/O糖基化修饰及PEG化修饰等高度复杂的多肽与蛋白质方面有显著优势。 它可以在完整水平上研究物质的整体相对分子量,结合其他正交分析手段,进一步确认该物质的整体序列分子量是否与预期一致。