2. 试剂盒中的 Positive Primers 和 Negative Primers 是什么? Re:是根据文献选择的,靶向 HEK293 细胞中 m6A 修饰的某段 RNA 区域(Positive Primers) 和无 m6A 修饰的某段 RNA 区域(Negative Primers)的 PCR 引物.可用于 RT-qPCR 验证实 验效率和特异性.需要注意的是:m6A 修饰和 RNA 的表达,具有很强...
性价比更高:包含RNA纯化磁珠,方便IP后RNA回收,无需另购RNA纯化试剂盒 多篇文章发表:已有多篇应用本试剂盒的m6A文章发表,见文末列表 实验流程 图1:GenSeq® m6A MeRIP试剂盒实验流程 结果展示 图2. MeRIP-qPCR检测结果:Input%分析 图3. MeRIP-qPCR检测结果:Fold Enrichment分析 图4. MeRIP-qPCR检测结果:信噪...
还有对应的试剂盒可以使用,其核心原理与ELISA反应类似,经过优化后检测m6A灵敏度也高。 还有一项必备的验证试验用来验证甲基化相关酶与关键基因结合:所谓m6A-IP-qPCR也叫MeRIP-qPCR,即利用m6A抗体在富集到带甲基化修饰的RNA后,下一步使用qPCR直接对富集到的RNA进行定量的一种技术。这种技术可以做到对发生甲基化的RNA进...
所谓m6A-IP-qPCR也叫MeRIP-qPCR,即利用m6A抗体在富集到带甲基化修饰的RNA后,下一步使用qPCR直接对富集到的RNA进行定量的一种技术。 这种技术可以做到对发生甲基化的RNA进行相对定量,是一种低成本的检测方法,仅需m6A抗体,A/G免疫磁珠,磁力架和qPCR仪及配套试剂盒即可开展这类实验。 第一步提取total RNA,作为可选...
性价比更高:包含RNA纯化磁珠,方便IP后RNA回收,无需另购RNA纯化试剂盒 多篇文章发表:已有多篇应用本试剂盒的m6A文章发表,见文末列表 实验流程 图1:m6A MeRIP试剂盒实验流程 结果展示 图2. MeRIP-qPCR检测结果:Input%分析 图3. MeRIP-qPCR检测结果:Fold Enrichment分析 ...
如果是lncRNA和mRNA都要研究,则需要先用试剂盒将total RNA的rRNA先消化干净,再进行打断。如果是进行高通量测序打断长度约为100nt左右,而qPCR 则需要长度至少在200nt以上,部分论文甚至打断长度在300-500nt左右甚至都不打断。一般根据文献中的资料显示,IP下来的片段用引物扩增出来的长度在130-150左右,所以100nt不到的...
所谓m6A-IP-qPCR也叫MeRIP-qPCR,即利用m6A抗体在富集到带甲基化修饰的RNA后,下一步使用qPCR直接对富集到的RNA进行定量的一种技术。 这种技术可以做到对发生甲基化的RNA进行相对定量,是一种低成本的检测方法,仅需m6A抗体,A/G免疫磁珠,磁力架和qPCR仪及配套试剂盒即可开展这类实验。
MeRIP-qPCR 应用场景:RNA修饰测序后的低通量验证,特定靶点的RNA修饰水平检测 技术原理:类似MeRIP-Seq,不同点是:IP后通过定量PCR进行检测,适合于检测几个或几十个特定的靶点。 云序MeRIP-qPCR产品: 云序提供各类不同修饰的MeRIP-qPCR服务,可针对mRNA,lncRNA,环状...
性价比更高:包含RNA纯化磁珠,方便IP后RNA回收,无需另购RNA纯化试剂盒 多篇文章发表:已有多篇应用本试剂盒的m6A文章发表,见文末列表 实验流程 图1:GenSeq® m6A MeRIP试剂盒实验流程 结果展示 图2. MeRIP-qPCR检测结果:Input%分析 图3. MeRIP-qPCR检测结果:Fold Enrichment分析 ...
该试剂盒使用针对哺乳动物rRNA逆转录和扩增后cDNA的特异性探针去除核糖体cDNA,极大降低了低起始量RNA片段化前,直接进行rRNA去除或poly(A) 尾富集过程中的RNA丢失。该试剂盒成功用于上述三种抗体IP富集RNA和input RNA的文库构建。三种抗体富集测序数据中,SETD7基因转录本的信噪比趋势跟RT-QPCR结果相一致(图2B)。每个...