lrpcr原理:LR-PCR技术的原理是利用长读长的优势,直接跨越完整的LR-PCR扩增子并保留相位信息,可以更准确地鉴定假基因。具体来说,LR-PCR技术利用长距离的PCR扩增,能够直接跨越基因组中的复杂区域,避免了传统PCR方法可能出现的非特异性扩增问题。同时,该技术可以保留扩增子之间的相位信息,这有助于更准确地鉴定假基因...
LR_PCR法500元/样15个自然日 提供样本 1、血液:最低10 μl,全血样本应使用普通EDTA抗凝管,避免使用肝素抗凝管; 2、唾液/口腔拭子:30-60 μl,保存于100 μl的1X PBS溶液中,-20°C以下保存,干冰运输; 3、毛囊:6-8根,样品置于1.5 ml EP管中,封口膜封好,冰袋或干冰运输; ...
6.PCR 反应分三步完成 ①第一步——变性,90 ℃高温下,使混合物的DNA 片断因变性而成单链。 ②第二步——退火,50 ℃温度下,引物DNA结合在适于配对的DNA片断上。 ③第三步——延伸,70 ℃温度下,由合成酶(DNA 高温聚合酶)催 化,从引物开始合成目的基因 DNA。 7.一个完整的PCR 的反应体系应具备以下条件...
A型血友病倒位检测的检测方法主要是长片段PCR(LR-PCR),通过PCR技术扩增出与A型血友病相关的基因片段,然后进行序列分析,从而确定个体的基因型。长片段PCR(LR-PCR)是一种高效、快速、准确的基因扩增技术,能够扩增长达20kb的DNA序列,因此被广泛应用于遗传基因检测领域。
SARS-CoV-2在呼吸道中持续存在,尤其存在于包括肝病在内的合并症患者中。即便在 RT-PCR检测呈阴性的患者中,被称为分子储存库的细胞外囊泡 (EV) 仍含有 SARS-CoV-2,这表明患者存在着持续感染。细胞外囊泡相关的SARS-CoV-2 RNA 可...
GeneCopoeia的 EZShuttle™重组克隆体系应用E.coli和λ噬菌体特异位点的重组酶促体系使 DNA片段在载体间相互转换,其原理与 Gateway克隆技术相同。 BP反应-构建入门载体: 通过PCR将attB位点添加到目的DAN序列两侧,形成attB-PCR产物。用attB-PCR产物或者含attB位点的供体质粒和含attP位点的质粒发生重组生成入门克隆。
(1)PCR克隆(定向TOPO克隆至入门载体或与供载体B×P重组) (2)限制性内切酶消化和连接进入入门载体 (3)使用pCMV?SPORT6或pEXP-AD502*构建Gateway兼容cDNA文库 (4)Gateway改造过的克隆资源* * 这些克隆资源和cDNA文库两边加有attB位点。这些克隆可以通过与供载体及BP Gateway酶反应转换到入门载体。获得已有克隆资源的...
本研究分析lrp16基因在白血病细胞系及白血病患者骨髓中的表达,探讨lrp16基因与白血病发生,发展的关系.采用逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)技术检测lrp16基因mRNA在4种白血病细胞系及115例白血病患者骨髓中的表达水平,并结合患者临床特征分析lrp16基因在白血病发生,发展中的作用.4种白血病细胞系包括慢性髓系白血病细胞系K562...
Gateway BP Clonase 酶同时包含 Int(整合酶)和 IHF(整合宿主因子)蛋白,它们催化来自克隆(包含 attB 位点)和供体载体(包含 attP 位点)的 PCR 产物或 DNA 片段的体外重组,从而产生入门克隆。查看下列选择指南,为你的研究目标查找最合适的 BP Clonase™ 酶。
目前大多数用Gateway技术构建载体的实验室中,主要通过以下两种方式构建: 第一,通过BP反应将DNA目标片段连接到pDONR载体上,得到entry载体,然后entry载体与终载体通过LR反应,将目标片段连接到终载体。但是BP酶价格昂贵,且在实际应用中,由于回收PCR产物的质量不高,浓度要求达不到BP反应的要求,这一步有点难度。 第二,通...