此外,该研究还显示,Si5-N14 LNP通过递送成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)的mRNA,有效恢复了病毒感染引起的肺损伤。 研究团队表示,该研究开发的SiLNP有助于将mRNA疗法应用于下一代组织特异性的蛋白质替代疗法、再生医学和基因编辑的临床转...
GFP-LNP转染HEK293S细胞并进行稳定性研究: 图1.GFP-LNP在HEK293S细胞中转染后,在4℃常规保存和使用远泰防冻剂-80℃保存24h均具有非常好的稳定性。 BCMA-CAR mRNA-LNP在NK细胞中的递送和表达: 图2. BCMA-CAR mRNA-LNP在NK细胞中...
制备GFP-mRNA-LNP并转染扩增的 NK 细胞,可产生>98%的GFP阳性细胞。将GFP-mRNA-LNP转染后16h的NK 细胞冻存在 D10 冻存培养基中,解冻后的转染NK细胞能够维持GFP表达水平,并且在解冻后72h显示出高水平的GFP表达(94.5%)。 03 基于mRNA-LNP技术制备CAR-NK细胞 制备CD19-Flag-CAR mRNA-LNP和人源化BCMA-CAR m...
若mRNA-LNP浓度较高,可在转染前使用opti-MEM对LNP进行稀释或定容。 4. 检测 在 转染48 小时后 ,收集细胞 ,流式检测 GFP 信号阳性率。 细胞转染结果见附录-附件5 --[4].大量的实践结果表明,293T细胞被支原体感染后,虽不影响Lipo-mRNA的转染,却会极大降低mRNA-LNP的转染效率。这会导致阳性对照正常,转染实验...
mRNA-LNP酸水解过程中碱基信号实时检测过程 第三,研究者采用辉瑞 Comirnaty 疫苗中使用的脂质配方制备GFP mRNA-LNP ,并在三个不同的时间点(19.5、25 和 42 小时)进行酸水解。通过酸水解-ID-LC-MS 定量碱基质量分数,并根据每个碱基测量值计算 mRNA 质量分数。nNucleobase 信号标准化为 SIL碱基内标,并标准化为纯...
图4 mRNA纳米颗粒对MSC的转染效果及细胞毒性 为进一步筛选载体，作者使用优化的载体与比例jetPEI （N/P 5）、jetMESSENGER（2：1 v/w）、MessengerMax（3：1 v/w） 和 RNAiMax（3：1 v/w）为递送 GFP 编码的 modRNA（图 4C）。GFP表达测定证实，使用基于脂质的载体（特别是MessengerMax和RNAiMax）可以更有效...
实验方案:微流控混合方式制备包裹mRNA的脂质纳米颗粒(mRNA-LNP的制备) 实验目的: 参照Moderna、BioNtech 和 Alnylam 的新冠疫苗配方,以SM102、ALC-0315、MC3为主要阳离子脂质制备包载 mRNA 的脂质纳米颗粒(lipid nanoparticles, LNPs)。 实验原理: ALC-0315、 MC3、和 SM102 是三种可用于人体的脂质。在酸性条件下...
通过远泰生物的mRNA-LNP递送平台,能够在多种细胞类型中实现瞬时基因表达。这种传递到靶位点的短期基因表达对于减少体内不必要的副作用具有重要优势。 GFP-LNP转染HEK293S细胞并进行稳定性研究: 图1.GFP-LNP在HEK293S细胞中转染后,在4℃常规保存和使用远泰防冻剂-80℃保存24h均具有非常好的稳定性。
计算RNA浓度,配制 mRNA-柠檬酸缓冲液 微流控混合制备LNP(智能LNP合成仪S2的操作说明) 粒径与PDI的检测 产物的处理和保存 终产物的电位检测 实验方案:使用Qubit测定LNP包封率 实验方案:使用酶标仪测定LNP包封率 实验方案:LNP转染293T细胞 附录 温馨提示:由于实验方案在不断优化更新,以下实验方案内容仅供参考,如有...
制备GFP mRNA LNP(996nt)时,在上述给定范围内提升流速,粒径和PDI会随之发生减小,包封效率略微有所增加,然而,这些LNP理化特性的改善对GFP mRNA LNP转染HepG2细胞的效率并无显著提升。 相比GFP mRNA,Cas9 mRNA(4522nt)要长得多。在总流速为0.3mL/min时,制备的Cas9 mRNA+sgRNALNP粒径大(300nm),异质性高(0.3...