一、原理: Lipo2000转染试剂是一种基于脂质体的转染方法。其原理是通过脂质体与目标DNA或RNA结合形成复合物,然后将复合物转染至靶细胞中。脂质体的疏水性结构使其能够与负电荷的核酸结合,从而实现核酸的传递。 二、步骤: 1. 准备工作: a. 将Lipo2000转染试剂取出并放置于室温下回温。 b. 根据实验需要,准备好需...
示例:如要制备 2 µM 储备液,将2 µl 的 20 µM siRNA 或 Stealth RNAi 储备液稀释于 18 μl 经 DEPC 处理的水中。 * 为提高准确度并减小检测变异性,我们推荐对各样本条件进行三次平行转染。 返回顶部 材料 开始前应准备好以下材料: 在适当的生长培养基中...
4.1 转染方法：将制备好的siRNA、siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种：磷酸钙共沉淀；电穿孔法；DEAE-葡聚糖和polybrene；机械法；阳离子脂质体试剂。目前用的最多的是阳离子脂质体法。4.1.1 磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的...
siRNA 细胞转染条件优化 B. Real-Time PCR RNAi 效果检测 C. Real-Time PCR 结果分析 15 Ⅵ. 蛋白质水平 RNAi 效果监测 A. western-blot 原理 B. western-blot 操作步骤 C. western-blot 上样液的制备 D. western-blot 常用试剂的配制 20 Ⅶ. RNAi 实验常见问题解答 22 2 Ⅰ. RNAi 简介 A. RNAi ...
siRNA 细胞转染条件优化 B. Real-Time PCR RNAi 效果检测 C. Real-Time PCR 结果分析 Ⅵ. 蛋白质水平 RNAi 效果监测 20 A. western-blot 原理 B. western-blot 操作步骤 C. estern-blot 上样液的制备 w D. western-blot 常用试剂的配制 Ⅶ. RNAi 实验常见问题解答 22 2 Ⅰ. RNAi 简介 A. RNAi ...
Lipofectamine 2000转染试剂是一种同时便于DNA或RNAi转染的试剂,易于针对广泛的细胞类型进行优化。 Lipofectamine 2000可以在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高效转染,Life Technologies提供的用于siRNA和质粒DNA共转染的最佳试剂。研究人员可使用Lipofectamine 2000试剂进行基于siRNA和shRNA的基因敲除实验及基因表达研究。
我一般是在细胞融合度60-70%时进行转染（这里说明下：因为是转染前1天经行铺板，铺板时细胞密度要掌握...
简要描述:Lipofectamine® 2000 转染试剂是一种多用途转染试剂,可在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高效转染。研究人员可使用 Lipofectamine® 2000试剂进行基于 siRNA和 shRNA的基因敲除实验及基因表达研究。 Lipofectamine® 2000是 Life Technologies提供的用于 siRNA和质粒 DNA共转染的Z佳试剂。
LipoGene 2000 Star转染试剂转染过表达质粒后,通常24-48 h后达到较高的蛋白表达水平,并且很多情况下蛋白表达量在转染后48 h显著高于转染后24 h;转染siRNA通常3-5天后对于目的基因的下调水平会比较理想。 LipoGene 2000 Star转染试剂转染细胞时,基本不受细胞培养液中血清影响,即可以在血清存在的情况下进行细胞转染。
答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 稳转还是瞬时转染与转染试剂无关,与转进去是什么东西有关.如果不是插入到基因组内的话,都不能算稳转.siRNA明显是瞬时转染,一会儿就降解了.如果做shRNA,可以做稳转. 解析看不懂?免费查看同类题视频解析查看解答