有限蛋白水解质谱技术(Limited Proteolysis Mass Spectrometry,LiP-MS)是研究小分子化合物(天然产物、代谢物等)与蛋白质相互作用,揭示蛋白结构动态变化的高通量质谱筛选技术。本公司推出LiP-MS药物靶点筛选解决方案,包含三种研究目的场景 LiP-MS药物靶点筛选:体外生理条件下寻找小分子药物的潜在作用靶点; LiP-MS药物-蛋白...
限制性酶解-质谱分析技术LiP-MS (Limited proteolysis-coupled mass spectrometry)是一种基于有限蛋白酶切的化合物靶点筛选技术,其独特之处在于无需对化合物进行修饰即可实现对特定化合物结合肽段进行筛选。LiP-MS技术是通过直接对化合物与蛋白质相互作用后的产物利用蛋白酶K和胰酶蛋白酶进行切割,然后利用质谱技术分析这些...
小分子pull down技术通过标记小分子药物进行亲和纯化,直接捕获与药物结合的靶蛋白复合物,适用于初步筛选潜在靶点。而LiP-MS技术基于小分子药物结合后诱导的蛋白构象变化,通过差异肽段分析直接定位结合位点,常用于靶点验证及机制解析。所以在药物筛选的实验过程中可以采用两者联用的方法,先用小分子pull down技术快速锁定候选...
一、老龄化相关结构变化的全局分析 研究者使用了磁活化亲和纯化技术,获取了年轻和衰老的酿酒酵母细胞组分,并通过LiP-MS技术比较了它们之间的蛋白质结构状态,结果显示,468种蛋白质(1272个肽段)发生了结构变化,年龄相关结构变化的蛋白质表现出更复杂的蛋白质-蛋白质相互作用和更多的代谢调节因子、翻译、蛋白质折叠和氧化...
LIP-MS原理 基于质谱技术对小分子-蛋白结合进行检测的技术。在生理条件下,蛋白处于动态平衡状态,会有各种合适的空间构象。当特定配体(如药物、小分子)等与特定蛋白结合时,会通过改变(增加)靶蛋白结构的稳定性,使蛋白抵抗水解。那相对于原蛋白由于位阻变化,不会暴露出广谱性蛋白酶酶切位点。
研究表明,LiP-MS技术在复杂细胞环境中展现出卓越的应用价值:它不仅能够系统性筛选结构特异性的蛋白质-蛋白质相互作用(PPIs),还可高效验证已知的PPIs,并精确定位相互作用界面,为解析蛋白质在天然状态下的结构和功能关系提供了强有力的工具。 LiP-MS在鉴定PPIs中的应用场景:...
lip-MS蛋白质组学技术 技术简介 蛋白质组是指在某一特定时间,特定条件下,某一特定组织中表达的所有蛋白质。基于质谱技术的蛋白质组学研究能够在一定范围内检测某一组织中的蛋白质组分和含量。然而许多生物过程是通过分子间的相互作用和化学修饰来调节的,对蛋白质丰度水平变化影响不大,无法使用传统的蛋白质组学进行...
LiP-MS,即限制性酶解-质谱分析技术,是一种强大的化合物靶点筛选工具。其独特之处在于,无需预先修饰化合物,即可直接通过蛋白酶K和胰酶对化合物与蛋白质的相互作用产物进行酶切,然后通过质谱技术解析酶解产物,通过对比不同酶切位点的多肽,确定与化合物结合的特定肽段。这个过程有助于鉴定出天然产物...
LiP-MS是利用有限蛋白水解技术与定量质谱分析结合的蛋白质组学分析方法,当化合物与蛋白质结合时会引发目标蛋白的特定结构改变,使得原本折叠未暴露的酶切位点因为结构改变而暴露出来,这种结构变化会进而改变蛋白质的水解模式,通过质谱检测可以捕捉这种变化。该研究结果表明,在短时间刺激下,发生表达量变化的蛋白质仅占总...
除了蛋白丰度差异外,蛋白结构也是影响蛋白功能的一个重要因素,然而针对蛋白结构差异的高通量筛选尚未实行。基于蛋白酶水解可及性变化的LIP-MS技术可以在蛋白组水平上同时观察蛋白丰度和结构的变化,则为神经退行性疾病新型标志物的发掘提供了助力。 研究背景 在多种神经退行性疾病中,衰老被认为是一个重要的影响因素。