3.通过3D成像技术,获得了猪耳蜗的细胞组织发育和LGR5表达的动态变化。 图2.猪耳蜗的发育阶段 研究意义 猪耳蜗模型在转化研究中的相关性比小鼠模型更高,为听力损失研究提供了一个重要的大动物模型,有助于理解听力损害、绘制耳蜗发育图,并在转化为人类治疗之前探索再生医疗疗法。 图3. LGR5在支持细胞中的表达随年龄...
因此，hfPO培养基支持分化为导管，而hfPO培养基允许所有三种胰腺细胞谱系的标志物的表达，但在15-16个GW衍生的类器官系中是独特的（图2）。图2.出芽型hfPO与囊性hfPO不同 3、hfPO产生腺泡谱系的细胞 研究人员应用CRISPaint用荧光蛋白tdTomato在C末端标记腺泡基因CPA 1和PTF 1A。这也允许随后分离和分析表达这些腺泡...
经过质量控制的scRNA-seq数据分析显示,这些类器官细胞可以分为五个主要的细胞簇,分别代表祖细胞、腺泡祖细胞、腺泡细胞、导管细胞和内分泌细胞。特别是,表达高水平的上皮干细胞标志物LGR5和TROY的细胞位于祖细胞簇的顶部。通过原位杂交和报告基因技术,研究人员证实了LGR5+和TROY+细胞的存在,并评估了它们的类器官形成能...
首先,研究者根据LGR5细胞相对于毛细胞和Corti隧道的相对位置(图6A),根据研究者在图5和S3中所描述的观察结果推断出LGR5细胞的身份。利用这些知识,研究者将LGR5细胞分配到一个支持细胞组(图6A和S3),例如,大上皮脊/内沟细胞(GER/ISC)...
发现了皮肤中一种表达LGR5细胞表面受体蛋白的成纤维细胞亚型,是系统性硬皮病的发生和发展中重要的中枢细胞。作者将这群成纤维细胞亚型命名ScAF细胞。
hfPO产生内分泌细胞的效力在培养物中持续存在,因为RTqPCR显示hfPO在体外扩增2年后仍然可以产生INS产生细胞。最后,c-肽的ELISA显示hfPO能够在分化后产生和分泌c-肽。总之,这支持hfPO能够产生更多分化的内分泌细胞(图4)。图4.hfPO可向内分泌谱系分化5、hfPO细胞概括了原代人胎儿胰腺组织的关键方面 在研究中,研究人员...
讨论：本研究采用优化的基因克隆技术与电穿孔法成功构建了LGR5基因过表达的稳定细胞株，并进行了初步的生物学功能分析。通过优化的实验条件，如使用威尼德电穿孔仪、特定的PCR扩增条件和稳定克隆筛选方案，显著提高了克隆效率与转染效率。该策略为进一步探讨LGR5在肿瘤中的功能提供了有力支持。结论：本研究建立了LGR5基因...
首先构建了Lgr5、Lgr5‑C(Lgr5上823位氨基酸后全部截断)和Lgr5‑190(Lgr5上190位氨基酸由丙氨酸变为天冬氨酸)的腺病毒,分别探究Lgr5基因的C末端和N末端对毛细胞的保护作用和内耳干细胞的再生作用,最后分别研究Lgr5基因的C末端和N末端在内耳中的作用机制,从而确定Lgr5基因对毛细胞的保护和支持细胞再生为毛细胞...
荷兰皇家艺术与科学院Hans Clevers团队研究报道了从妊娠8-17周(8-17GW)胎儿胰腺样品中衍生的18个人胎儿胰腺类器官(hfPO)系,其中4个细胞系衍生自15-16个GW样品,在优化的培养条件下,产生腺泡、导管和内分泌谱系细胞,持续扩增超过2年。单细胞RNA测序鉴定胎儿胰腺和hfPO中罕见的LGR5+细胞,作为发育层次的基础。这些LGR...
胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤。胃癌的细胞起源是本领域的热点科学问题。由于长期以来一直缺乏胃组织干细胞的分子标志物,胃组织干细胞失调是否能够导致胃癌缺乏直接的体内证据。最近5年胃组织干细胞的标记物如Lgr5和Troy等被陆续鉴定出来,但关于胃组织干细胞在胃癌发生发展中的作用还缺乏体内的证据支持。