Lgr5基因在生物体内具有关键的生物学功能，其编码的蛋白质属于G蛋白偶联受体家族。Lgr5被广泛认为是多种组织干细胞的重要标志物，在肠道、胃、皮肤等组织的干细胞维持和组织再生过程中发挥着核心作用。对Lgr5基因的深入研究，有助于我们理解组织发育、稳态维持以及疾病发生发展的机制。细胞转染技术是现代生物学研究中不...
在细胞转染株构建方面，已经成功建立了多种人源和鼠源的 Lgr5 基因转染细胞系，并利用这些细胞系深入研究了 Lgr5 在干细胞自我更新和分化中的作用机制。在单抗研发上，一些国外团队已经开发出了具有高亲和力和特异性的抗 Lgr5 单抗，并在动物模型中验证了其在肿瘤治疗中的潜在效果。（2）国内研究情况：国内科研...
Lgr5基因(eucine-rich-repeat-containing G-protein-coupled receptor 5, 也称Gpr49),是从肠道Wnt靶位的诸多基因中挑选出的,只在小肠绒毛的凹陷处(crypt)表达。 由于Wnt信号构成绒毛基部生理学活动背后的主要调节因素,作者假设一些Wnt靶基因可能在小肠干细胞中特异性表达。作者发现大约80个选择的Wnt靶基因大多数在Pan...
Lgr5-EGFP-IRES-creERT2 等位基因在肝脏中永久沉默。因此,作者通过将 IRES-creERT2 盒插入 Lgr5 基因座的 3' 非翻译区 (UTR) 而不是第一个外显子中来生成新的 Lgr5 等位基因,并将这些小鼠与 Rosa26-lacZ 报告基因杂交。单次他莫昔芬注射后,在肠道中很容易检测到谱系追踪事件,验证了该等位基因。成年后...
Wnt 靶基因 Lgr5标记 Wnt 驱动的自我更新组织(如小肠和结肠、胃和毛囊)中活跃分裂的干细胞。三维培养系统允许单个 Lgr5 + 干细胞长期克隆扩增成可移植的类器官(出芽囊肿),这些类器官保留了原始上皮结构的许多特征 。培养基的一个关键组成部分是 Wnt 激动剂 RSPO1 ,这是最近发现的 LGR5 配体。
1. LGR5基因克隆与载体构建：首先，从人类细胞RNA中提取总RNA，并采用逆转录酶将其转录为cDNA。使用特异性引物进行PCR扩增LGR5基因，扩增条件为：94°C预变性5分钟，接着进行30个循环，每个循环包括94°C 30秒，55°C退火30秒，72°C延伸1分钟，最后72°C延伸10分钟。PCR产物经电泳验证后，回收并纯化。接着将...
Lgr5是一个Wnt靶基因,在胃肠道中Lgr5主要表达在一类分泌型细胞中。研究人员发现,在颌关节中也有表达Lgr5的细胞存在,具体情况为,E14.5天时,Lgr5表达细胞主要分布在踝胚基(condylar blastema, CB)的表面,环绕着Meckel’s软骨和中耳骨。在E16.5天...
1. LGR5基因克隆与载体构建: 首先,从人类细胞RNA中提取总RNA,并采用逆转录酶将其转录为cDNA。使用特异性引物进行PCR扩增LGR5基因,扩增条件为:94°C预变性5分钟,接着进行30个循环,每个循环包括94°C 30秒,55°C退火30秒,72°C延伸1分钟,最后72°C延伸10分钟。PCR产物经电泳验证后,回收并纯化。接着将LGR5基...
此外，来自在原始haPO培养基中培养的15至16个GW样品的hfPO不表达腺泡或内分泌祖细胞基因。因此，hfPO培养基支持分化为导管，而hfPO培养基允许所有三种胰腺细胞谱系的标志物的表达，但在15-16个GW衍生的类器官系中是独特的（图2）。图2.出芽型hfPO与囊性hfPO不同 3、hfPO产生腺泡谱系的细胞 研究人员应用CRISPaint用...
骨关节炎中过表达的典型Wnt信号会导致软骨稳态丧失,进而与骨关节炎发生发展相关。而Wnt靶基因Lgr5存在于多种成体干细胞,同时在对维持组织起重要作用的分泌细胞中表达。近来研究表明,在发育中的关节区间细胞和外浅表区细胞中存在表达lgr5...