LC-II由于磷脂酰乙醇胺的修饰，导致电荷的变化，使得迁移率更快，所以SDS-PAGE中显得分子量比LC3-I小。
LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益于荧光蛋白技术的发展，我们可以通过荧光蛋白标记的方式，直观的看到自噬现象和过程。自噬病毒工具，便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。自噬单荧光标记慢病毒 吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品...
LC3蛋白合成后被Atg4剪切掉C端5肽,暴露甘氨酸残基,产生胞浆定位的LC3-I。在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE)相偶联,形成LC3-II并定位于自噬体内外膜上。自噬体和溶酶体融合后,外膜上的LC3-II被Atg4切割,产生LC3-I循环利用;内膜上的LC3-II被溶酶体酶降解,...
一篇所握必别纸圆阳组言成文献说,LC3-II疏水极性较强,所以电泳迁移率比LC3-I快。LC3-II的实际分子量比LC3-I大,但是表观分子量较小,在SDS-PAGE电泳中,LC3-II分子量定量为14kD,LC3-I分子量定量为啊完队16kD。可以看下面这篇文献的Introduction部分。参考文献:Mizushima N, Yoshimori T. How to interpret LC...
自噬过程中,LC3-I在Atg7和Atg3作用下(和泛素修饰过程很像),与磷脂酰乙醇胺共价结合,LC3-I 被脂质化为 LC3-II,结合在自噬体膜上。LC3-Ⅱ常用作自噬形成的标识物,也是一种重要的定位于自噬胞膜上的多信号传导调节蛋白。LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的...
LC3是公认的自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。在哺乳动物中,LC3包含3种亚型:LC3A、LC3B、LC3C,分布在不同的组织中,因此需要用不同的抗体去鉴定这3种亚型。
LC3-II 的分子量大于LC3-I,分子间存在极强的疏水作用力,SDS-PAGE 电泳时LC3-II 涌动的速度比LC3-I 快,所以可以检测到两条带,上面的条带为LC3-I,下面的条带为LC3-II,典型的western 结果如下:通过western blot 检测ATG12-ATG5 和LC3 的水平,判断机体的自噬现象。3Weste...
LC3II是。LC3Atg8被具有蛋白内切酶活性的Atg4在羧基端剪切，生成胞质LC3I。LC3I通过Atg7和Atg3分别对应E1和E2样酶参与的泛素样反应，使磷脂酰乙醇胺PtdEth，PE偶联，生成脂质化形式的LC3，也称作LC3II，它可以附着到自噬体autophagosome的膜上，是自噬体的结构蛋白。在降解过程中，位于自噬溶酶体外膜的LC3...
LC3-I的分子量约16KD,由于LC3-II接合了PE基团,所以理论上,LC3-II的分子量比LC3-I更高。但是,由于带负电的PE改变了LC-II的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高,所以,LC3-II在电泳后,停留在了更小分子量(约14KD)处。 小分子量、LC3-I与LC3-II仅有2KD差异,在WB中需注意: ...