. 10 17 微管相关蛋 白 I 轻链 3( LC3) 的基 因表达及 单克隆抗体制备 张海,师长宏 ,赵勇 ,缪珊 ,张廷芬 ,伍静 (第 四军医大学 实验 动物 中心 , 药物研 究所 , 西安710032) 【 摘要l 目的 克隆 LC3 基因, 体外表达后制备抗 LC3 单克隆抗体 , 为自噬研究提供相关实验材料。方法 RT-PCR 方法从 ...
目的克隆LC3基因,体外表达后制备抗LC3单克隆抗体,为自噬研究提供相关实验材料.方法RT-PCR方法从RAW264.7细胞基因组中克隆LC3基因,连接至pQE80L原核表达载体后转化E.coli DH5(进行诱导表达,SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定表达蛋白.蛋白纯化后免疫BALB/C小鼠制备LC3抗单克隆抗体.结果克隆了LC3基因,并对其在E.coli DH5...
常规试剂、生化试剂 细胞生物学: 培养基和添加剂 细胞培养血清 细胞转染和感染 细胞增殖分化 细胞凋亡和自噬 细胞株 氧化应激 样本制备和冻存 其它辅助试剂 生化试剂: 抗生素 酶(底物) 变性剂 多肽 荧光探针和染色剂 发光化合物 内毒素检测 糖类 去垢剂 氨基酸 生物缓冲液 分子生物学: 核酸提取/纯化 PC...
MAP1LC3C Knockout HEK293T Cells (MAP1LC3C基因敲除HEK293T细胞)是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因,并实现了目的基因CRISPR敲除的HEK293T细胞。本细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。本细胞株是多克隆细胞,可用于该目的基因的生物学功能研究,也可以用于该基因相应抗体的验证。
pLenti-MAP1LC3C-sgRNA (MAP1LC3C基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因,或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。本质粒在细菌中为Amp抗性,全...