自噬形成时,胞浆型LC3-I会酶解掉一小段多肽,随后跟PE结合转变为膜型的LC3-II。因此可以通过LC3-II/I比值的大小估计自噬水平的高低。 图1. WB检测自噬通量示意图(Yoshii, S.R. and N. Mizushima. Int J Mol Sci, 2017.) ②除LC3外,其他自噬底物表达量的变化也可以用于监测自噬流。其中,p62是研究广泛的...
LC3是公认的自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。在哺乳动物中,LC3包含3种亚型:LC3A、LC3B、LC3C,分布在不同的组织中,因此需要用不同的抗体去鉴定这3种亚型。 分享按钮 细胞自噬(Autophagy)是一类细胞内...
因此可以通过LC3-II/I比值的大小估计细胞自噬水平的高低。 图1. WB检测LC3和p62蛋白表达示意图 (Yoshii, S.R. and N. Mizushima. Int J Mol Sci, 2017.) 荧光显微镜法观察法 LC3蛋白被募集到自噬体形成绿色点状结构,因此,可以通过荧光显微镜观察内源性LC3或GFP-LC3,即可实现对细胞自噬发生的检测。与不存在溶...
LC3是自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。 pro-LC3;立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽,暴露甘氨酸,这个是LC3-I,胞浆分布。自噬过程中,LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下(和泛素修饰过程很像),...
LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益于荧光蛋白技术的发展，我们可以通过荧光蛋白标记的方式，直观的看到自噬现象和过程。自噬病毒工具，便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。自噬单荧光标记慢病毒 吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品...
① 利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化评价自噬形成(图8)。自噬形成时,胞浆型LC3-I会酶解掉一小段多肽,随后跟PE结合转变为膜型的LC3-II。因此可以通过LC3-II/I比值的大小估计自噬水平的高低。 图8. WB检测LC3、p62蛋白的表达(Yoshii, S.R. and N. Mizushima. Int J Mol Sci, 2017) ...
LC3是自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。 pro-LC3;立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽,暴露甘氨酸,这个是LC3-I,胞浆分布。自噬过程中,LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下(和泛素修饰过程很像),...
LC3是公认的自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。在哺乳动物中,LC3包含3种亚型:LC3A、LC3B、LC3C,分布在不同的组织中...
利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价细胞自噬形成。细胞自噬形成时,胞浆型LC3-I会酶解掉一小段多肽,随后跟PE结合转变为膜型的LC3-II。因此可以通过LC3-II/I比值的大小估计细胞自噬水平的高低。 图1. WB检测LC3和p62蛋白表达示意图 (Yoshii, S.R. and N. Mizushima. Int J Mol Sci, 2017.) ...
自噬过程中,LC3-I在Atg7和Atg3作用下(和泛素修饰过程很像),与磷脂酰乙醇胺共价结合,LC3-I 被脂质化为 LC3-II,结合在自噬体膜上。LC3-Ⅱ常用作自噬形成的标识物,也是一种重要的定位于自噬胞膜上的多信号传导调节蛋白。LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的...