LC3是自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。 pro-LC3;立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽,暴露甘氨酸,这个是LC3-I,胞浆分布。自噬过程中,LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下(和泛素修饰过程很像),...
LC3/Atg8 被具有蛋白内切酶活性的Atg4在羧基端剪切,生成胞浆型 LC3-I。在自噬形成时,胞浆型LC3-I通过Atg7 和Atg3(分别对应泛素激活酶E1和泛素结合酶E2)参与的类泛素样反应,使磷脂酰乙醇胺 (PE) 偶联,生成脂质化形式的 LC3,也称作 LC3-II,它附着到自噬体(autophagosome)的膜上,是自噬体的结构蛋白,即自噬体...
LC3是自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3即LC3I会酶解掉一小段多肽,转变为自噬体膜型即LC3II,LC3III比值的大小可估计自噬水平的高低。
LC3蛋白合成后被Atg4剪切掉C端5肽,暴露甘氨酸残基,产生胞浆定位的LC3-I。在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE)相偶联,形成LC3-II并定位于自噬体内外膜上。自噬体和溶酶体融合后,外膜上的LC3-II被Atg4切割,产生LC3-I循环利用;内膜上的LC3-II被溶酶体酶降解,...
LC3-I是原生态的形式,当自噬过程发生时,LC3-I会经过磷酸化形成LC3-II。LC3-II水平的变化常被用来研究自噬的活性和程度。 三、LC3蛋白的表示方法 1. 免疫印迹法 免疫印迹法是最常用的检测蛋白表达水平的方法之一。研究人员通常通过免疫印迹法来检测细胞中LC3-I和LC3-II的水平变化,进而判断细胞的自噬活性。 2. ...
LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益于荧光蛋白技术的发展,我们可以通过荧光蛋白标记的方式,直观的看到自噬现象和过程。自噬病毒工具,便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。自噬单荧光标记慢病毒 吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品...
LC3,全称为自噬相关蛋白LC3,是细胞内自噬过程中的关键标志物。当细胞需要进行自噬,即分解自身结构以回收利用物质时,胞浆中的LC3-I会被一种酶水解一小段肽链,转变成LC3-II。LC3-II与LC3-I的比例变化反映了细胞自噬的活跃程度。LC3-I在胞浆中分布,而LC3-II则通过与磷脂酰乙醇胺的共价结合,附着...
当LC3-I和LC3-II总量恒定时,LC3-II/LC3-I用来表示自噬的水平。其次,与LC3-II相比,LC3-I对反复冻融更加敏感,更容易降解,因此一般需要用新鲜制备样品上样。这点倒是有可能,之前制好的样本经过几次优化和反复冻融,有可能造成LC3-I检测不到。 师兄说:选择合适的一抗也很重要...