LC3-II的表达水平通常与自噬体的数量相关。 ◆应用 ● Western Blot: 1/500-1/1,000. ●预测分子量:LC3-I为18 kDa, LC3-II为16 kDa ●MEF +/- 饥饿处理2小时 ●SDS-PAGE (MEF溶解物 15 µ/lane, 15% gel) ●转移到PVDF膜上 (半干转印, 100 mA/gel 1小时) ●LC3B免疫印迹 ●ECL曝光5分钟 ...
指标别名Microtubule-associated protein 1 light chain 3 beta;MAP1LC3B;MAP1ALC3;LC3-I;LC3-II;LC3I;LC3II 克隆性Polyclonal 检验物种human,mouse,rat 应用范围WB 基因名称MAP1LC3A/MAP1LC3B/MAP1LC3C 抗体来源Rabbit 抗体类型IgG 计算分子量15kDa 成分Rabbit IgG,1mg/mL in PBS with 0.02% sodium azide,50% gl...
所以,LC3II电泳后停留在更小分子量(约14kDa)。 5.由于LC3-I 与 LC3-II 分子量小,又仅有 2 KD 差异,WB注意选用高浓度分离胶(约15%),转膜使用0.22μm转印膜,湿转70V,1.5h或半干转2.5A,7min。
由于LC3是脂化和膜相关蛋白,在细胞裂解时,可在冰上短暂超声,以促进蛋白溶解,使得LC3顺利从膜上解离。此外,LC3-II的分子量约16KD,LC3-I在电泳后停留在14KD处,两者均为小分子量蛋白,且差距仅2KD。因此在WB时要注意使用高浓度分离胶进行分离(建议约15%),转膜时使用小孔径0.2um的NC膜,采用恒流200mA,转膜40min...
LC3是一个膜相关蛋白，裂解细胞时，需使用冰上短暂超声促进蛋白溶解，将LC3从膜上解离。LC3-I与LC3-II的分子量虽仅有2KD差异，但在电泳中，由于PE基团的影响，LC3-II的迁移率更高，停留在更小分子量处。综合来看，LC3检测需要考虑到LC3的动态生成与降解，选择合适的抗体与方法，理解LC3的来源与分布...
LC3A和LC3B是主要的研究对象，而LC3C由于低表达和研究较少，通常被忽视。LC3-I和LC3-II的区分是理解自噬状态的关键，但要注意，抗体检测的抗原表位通常位于LC3的N端，这可能导致LC3-II/LC3-I比值的误差。进行LC3检测时，首要任务是评估样本的表达类型和量。对表达量低或不表达LC3的样本，自噬研究的...
由于PE基团结合导致N端区域构象变化，抗体对LC3-II亲和性更高，LC3-II/ LC3-I 比值存在较大误差。LC3-I对反复冻融更为敏感，需用新鲜制备样品上样，以防止LC3-I检测不到。LC3-I和LC3-II分子量有2KD差异，但在WB中需使用高浓度分离胶进行分离，转膜时注意使用小孔径转印膜。
在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系所修饰和加工,产生分子量为14kD的LC3-II,并定位到自噬小体中。 LC3-II/I比值的大小可评估自噬水平的高低。 今天给大家带来的就是最广泛研究的LC3、P62和其他自噬相关明星蛋白抗体产品。发布于 2022-01-13 17:30 ...
当然通过使用抗LC3A/B抗体,同时检测LC3A和LC3B,可以大大增加实验的成功率。 敲黑板,如何跑好LC3-1和LC3-II? LC3-1和LC3-II是小分子蛋白,LC3-I的分子量约16KD,由于LC3-II接合了PE基团,所以理论上,LC3-II的分子量比LC3-1更高。但是,由于带负电的PE改变了LC-II的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移...