LC3 I是未修饰的形式,而LC3 II是经过磷酸化和脂化修饰的形式。LC3 II在自噬过程中会转移到自噬体膜上,因此LC3 II的水平可以反映自噬的活性。 2. 免疫印迹法:常用的检测LC3的方法是免疫印迹法。首先,需要制备细胞提取物,并使用蛋白质浓度检测方法确定提取物的蛋白质浓度。然后,将相同量的蛋白质加载到SDS-PAGE...
内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体,此时LC3I蛋白被修饰形成LC3II蛋白,LC3II蛋白促使自噬体与溶酶体融合,完成损伤的线粒体降解。研究人员选取周龄一致的大鼠随机分为对照组、中等强度运动组和大强度运动组。训练一段时间后,测量大鼠腓肠肌细胞LC3I蛋白和LC3II蛋白的相对含量,结果如下图。下列叙述不正确的是( ) A...
LC3-I 的分子量约 16 KD,由于 LC3-II 接合了 PE 基团,所以理论上,LC3-II 的分子量比 LC3-I 更高。但是,由于带负电的 PE 改变了 LC-II 的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高,所以,LC3-II 在电泳后,停留在了更小分子量(约 14 KD)处。 小分子量、LC3-I 与 LC3-II 仅有 2 KD 差...
LC3-I 和LC3-II 是小分子蛋白 LC3-I的分子量约16KD,由于LC3-II接合了PE基团,所以理论上,LC3-II的分子量比LC3-I更高。但是,由于带负电的PE改变了LC-II的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高,所以,LC3-II在电泳后,停留在了更小分子量(约14KD)处。 小分子量、LC3-I与LC3-II仅有2KD差异,...
LC3/Atg8 被具有蛋⽩内切酶活性的Atg4在羧基端剪切，⽣成胞质 LC3-I。LC3-I通过Atg7 和 Atg3（分别对应 E1 和 E2 样酶）参与的泛素样反应，使磷脂酰⼄醇胺 (PtdEth，PE) 偶联，⽣成脂质化形式的 LC3，也称作 LC3-II，它可以附着到⾃噬体(autophagosome)的膜上，是⾃噬体的结构蛋⽩。在降解...
一篇所握必别纸圆阳组言成文献说,LC3-II疏水极性较强,所以电泳迁移率比LC3-I快。LC3-II的实际分子量比LC3-I大,但是表观分子量较小,在SDS-PAGE电泳中,LC3-II分子量定量为14kD,LC3-I分子量定量为啊完队16kD。可以看下面这篇文献的Introduction部分。参考文献:Mizushima N, Yoshimori T. How to interpret LC...
LC3-I的分子量约16KD,由于LC3-II接合了PE基团,理论上LC3-II的分子量比LC3-I更高。但是,由于带负电的PE改变了LC-II的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高,所以在SDS-PAGE中LC3-II显得分子量比LC3-I小。 LC3-I与LC3-II仅有2KD差异,在WB中需注意:建议使用高浓度分离胶(如15%)进行分离;转膜...
LC3-II水平的变化常被用来研究自噬的活性和程度。 三、LC3蛋白的表示方法 1. 免疫印迹法 免疫印迹法是最常用的检测蛋白表达水平的方法之一。研究人员通常通过免疫印迹法来检测细胞中LC3-I和LC3-II的水平变化,进而判断细胞的自噬活性。 2. 免疫荧光染色法 免疫荧光染色法是通过对细胞进行荧光标记,观察LC3蛋白在细胞...
在自噬过程中，LC3存在两种形式，即LC3-I和LC3-II。LC3-I是未修饰的形式，主要存在于胞浆中。当细胞感应到自噬信号时，LC3-I会被磷酸化成LC3-II，并与自噬囊泡相关膜结合。这样，LC3-II就能够将自噬囊泡与其他细胞器结合，并引导其合并并形成自噬泡。在自噬过程中，LC3不仅起着关键的调控作用，还具有与其他...
LC3-I的分子量约16KD,由于LC3-II接合了PE基团,所以理论上,LC3-II的分子量比LC3-I更高。但是,由于带负电的PE改变了LC-II的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高,所以,LC3-II在电泳后,停留在了更小分子量(约14KD)处。 小分子量、LC3-I与LC3-II仅有2KD差异,在WB中需注意: ...