细胞自噬是一种细胞内废弃物处理和再利用的机制,它在维持细胞内稳态、清除病理性蛋白质聚集物和应对压力等方面起着重要作用。LC3蛋白(也称为Microtubule-associated protein 1 light chain 3)是一种与细胞自噬相关的蛋白质,在细胞自噬的过程中发挥重要的作用。通过检测LC3蛋白的表达水平和形态变化,可以研究细胞自噬的活...
抗体选择:目前大部分LC3抗体选择的抗原位于N端,PE基团的加入可能会使得N端蛋白构象变化,导致抗体对LC3的亲和力增强,所以LC3-II条带深并不能代表该样本处于高自噬状态。 冻融敏感性:LC3-II对冻融比较敏感,容易在SDS上样缓冲液降解。因此,在做半定量检测时,除了使用LC3-II/LC3-I的比值外,也可以配合使用LC3-II与...
LC3 蛋白最初以前体形式（pro - LC3）存在，包含 120 个氨基酸残基。其结构中含有一个保守的 C - 末端结构域和一个可变的 N - 末端区域。C - 末端结构域对于 LC3 与其他自噬相关蛋白的相互作用至关重要，而 N - 末端区域则可能参与调节 LC3 的定位和功能。功能机制 自噬体形成：在自噬诱导信号的作用下，...
经过这样一系列复杂的反应,生成的LC3-II具备了特殊的能力,它能够特异性地附着在自噬体膜上,成为自噬体极为重要的标志性蛋白,为自噬体的形成与成熟助力。 LC3蛋白在自噬体形成中的作用。 1. 自噬体膜的延伸:当LC3-II形成并结合到自噬体膜上后,会在膜上持续聚集。这种聚集就如同搭建房屋时不断添加的砖块,促使...
一、LC3蛋白 1. LC3蛋白结构 LC3蛋白是一个与膜相关的蛋白,在哺乳动物中有7个同源物种,包括LC3A、LC3B和LC3C等亚型。LC3蛋白的分子结构主要包括轻链和重链两部分,轻链包括N端和C端,重链包括GABARAP dom本人n和LC3连接肽等。 2. LC3蛋白功能 LC3蛋白在细胞自噬过程中起着关键作用,它是自噬小体膜的组成成分,参...
自噬相关蛋白LC3是微管相关蛋白的一种，它在自噬过程中起着关键作用。LC3即微管相关蛋白Light Chain 3，是哺乳动物细胞中自噬过程中的关键蛋白。以下是关于LC3的 1. LC3蛋白简介：LC3是自噬体中一类重要的蛋白质标记物，主要分为LC3A和LC3B两种形式。它作为细胞自噬过程的标志性分子，对研究细胞自噬机制...
自噬发生时，LC3 蛋白合成后立即在其羧基端被 Atg4 所剪切，产生细胞浆定位的 LC3-I。在自噬过程中，LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3 在内的泛素样体系所修饰和加工，产生分子量为 14kD 的 LC3-II，并定位到自噬小体中。LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益...
小优细节君今天要介绍的主角是目前公认的自噬标记物:微管相关蛋白1的轻链3(microtubule-associated-proteinlight-chain-3,LC3) LC3蛋白合成后被具有蛋白内切酶活性的Atg4在羧基端剪切,产生胞浆定位的LC3-I。在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛...
关于LC3蛋白结构,需要了解其存在两种形式:胞质型LC3-I和膜结合型LC3-II。磷酸化主要发生在N端区域,比如Thr6、Ser12等特定氨基酸位点。这些位点就像开关按钮,磷酸基团的添加或去除会改变蛋白构象,影响与ATG蛋白家族成员的结合能力。 实验发现Ser12位点磷酸化能增强LC3与p62蛋白的相互作用。当细胞处于营养匮乏状态时,AMPK...
LC3-II水平的变化常被用来研究自噬的活性和程度。 三、LC3蛋白的表示方法 1. 免疫印迹法 免疫印迹法是最常用的检测蛋白表达水平的方法之一。研究人员通常通过免疫印迹法来检测细胞中LC3-I和LC3-II的水平变化,进而判断细胞的自噬活性。 2. 免疫荧光染色法 免疫荧光染色法是通过对细胞进行荧光标记,观察LC3蛋白在细胞...