LC3-II 的分子量大于LC3-I,分子间存在极强的疏水作用力,SDS-PAGE 电泳时LC3-II 涌动的速度比LC3-I 快,所以可以检测到两条带,上面的条带为LC3-I,下面的条带为LC3-II,典型的western 结果如下:通过western blot 检测ATG12-ATG5 和LC3 的水平,判断机体的自噬现象。3...
目前的LC3抗体所检测的抗原表位都位于LC3的N端,由于PE基团结合可能导致N端区域的构象变化,使得抗体对LC3-II的亲和性更高,所以LC3-II条带显色深并不能代表该样本处于高自噬状态。另外,LC3-I对反复冻融更为敏感,也更易在SDS上样缓冲液中降解。基于以上两个原因,在半定量时,除了使用LC3-II/LC3-I的比值外,也有...
一分钟带你了解wb实验-WB常见问题及注意事项 WB常见问题及注意事项 一、蛋白样本制备1、蛋白质的样品制备是Western Blot的第一步,WB待测组织净重与裂解液的体积比例为1g:10ml。同时,还应注意以下问题: (1)在合适的条件下,保持蛋… 医学小丽 干WB实验的6点经验 华仁医学科技 这些WB实验小细节你注意到了吗? WB...
目前的LC3抗体所检测的抗原表位都位于LC3的N端,由于PE基团结合可能导致N端区域的构象变化,使得抗体对LC3-II的亲和性更高,所以LC3-II条带显色深并不能代表该样本处于高自噬状态。另外,LC3-I对反复冻融更为敏感,也更易在SDS上样缓冲液中降解。基于以上两个原因,在半定量时,除了使用LC3-II/LC3-I的比值外,也有...