液相色谱-质谱联用 (LC-MS) 是一种强大的技术,经常用于检测和定量生物大分子,特别是蛋白质和其他生物分子的修饰。组蛋白修饰是一种重要的表观遗传现象,涉及到组蛋白的氨基酸残基(如赖氨酸和精氨酸)上的化学修饰。这些修饰可能包括乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化和其他多种修饰。图1.组蛋白翻译后修饰鉴定研究...
LC-MS技术在差异蛋白研究中发挥着重要的作用,具有以下几个应用方面:2.1差异蛋白的鉴定:通过LC-MS技术,可以对生物样品中的蛋白质进行高通量鉴定,发现在不同生理或病理状态下表达差异显著的蛋白质。2.2蛋白质定量:利用LC-MS技术的定量功能,可以对差异蛋白的表达水平进行准确的定量,比较不同样品之间的差异。2....
免疫共沉淀(Co-IP)联合质谱(LC-MS/MS)研究蛋白互作 应用二:CyTOF中通量肿瘤免疫微环境单细胞分析 如果只是检测某几个蛋白,普通的流式细胞术就能满足需要,但是由于细胞的代谢流变化迅速且牵涉较多的代谢调控基因和酶,那普通的流式就显得有心无力了。质谱流式技术是一种多维度的单细胞分析技术,可用于蛋白或 RNA ...
血清LC-MS测蛋白质就是利用LC-MS技术对血清中的蛋白质进行鉴定。由于血清中含有各种蛋白质、多肽、脂质、糖类和无机化合物等,需要通过液相色谱技术将血清中的混合物与多种组分进行分离,再将分离得到的不同蛋白质组分利用质谱技术进行高灵敏度的质量检测,最后将质谱数据与蛋白数据库中的数据信息进行比对分析,从而实...
在进行LC-MS测蛋白表达之前,首先需要对样品进行制备。常见的样品制备方法包括细胞裂解、蛋白质提取和消化等步骤。细胞裂解可以通过机械破碎或化学方法实现,以释放细胞内的蛋白质。蛋白质提取则是将裂解后的细胞或组织中的蛋白质分离出来。最后,消化步骤将蛋白质分解为肽段,以便于后续的质谱分析。1.2液相色谱分离 液...
LC-MS/MS结合色谱分离和质谱检测的优点,可以对复杂样品进行有效分析。在小分子与蛋白结合的研究中,首先,通过色谱部分将小分子与蛋白分离,然后通过质谱部分进行鉴定和定量分析。 三、确定小分子与蛋白的结合 通过使用LC-MS/MS,可以检测到小分子与蛋白质的非共价结合。小分子在结合后,通常会改变蛋白质的整体电荷状态,...
1. LC-MS测蛋白表达技巧 1.1样品制备 在进行LC-MS测蛋白表达之前,首先需要对样品进行制备。常见的样品制备方法包括细胞裂解、蛋白质提取和消化等步骤。细胞裂解可以通过机械破碎或化学方法实现,以释放细胞内的蛋白质。蛋白质提取则是将裂解后的细胞或组织中的蛋白质分离出来。最后,消化步骤将蛋白质分解为肽段,以便于...
1. LC-MS测蛋白表达技巧 1.1样品制备 在进行LC-MS测蛋白表达之前,首先需要对样品进行制备。常见的样品制备方法包括细胞裂解、蛋白质提取和消化等步骤。细胞裂解可以通过机械破碎或化学方法实现,以释放细胞内的蛋白质。蛋白质提取则是将裂解后的细胞或组织中的蛋白质分离出来。最后,消化步骤将蛋白质分解为肽段,以便于...
组蛋白乙酰化是生物体的重要生理过程之一,它在基因表达调控、DNA修复、细胞周期和肿瘤等方面起着关键作用。近年来,对组蛋白乙酰化的研究逐渐深入,LC-MS(液相色谱-质谱)技术作为检测组蛋白乙酰化的重要分析手段得到了广泛应用。 图1.乙酰化修饰研究路线 一、组蛋白乙酰化 ...
在进行LC-MS测蛋白表达之前,首先需要对样品进行制备。常见的样品制备方法包括细胞裂解、蛋白质提取和消化等步骤。细胞裂解可以通过机械破碎或化学方法实现,以释放细胞内的蛋白质。蛋白质提取则是将裂解后的细胞或组织中的蛋白质分离出来。最后,消化步骤将蛋白质分解为肽段,以便于后续的质谱分析。