LC-MS/MS质谱分析可用于检测残留化合物、鉴定有机小分子以及确认和定量制药和食品样品中的污染物和掺杂物,另外,还可以用于分析蛋白质等大分子物质,例如蛋白质测序、蛋白质翻译后修饰位点分析、定量蛋白质组学等。在LC-MS/MS分析中,样品溶液首先进入色谱仪,不同物质与色谱仪中的固定相和流动相之间的相互作用不...
LC-MS/MS蛋白鉴定 * 技术原理 质谱是将待测物质变为气态离子并将离子按质荷比(m/z)进行分离和分析的一种方法。蛋白先经胰蛋白酶消化成肽段,肽段在质谱仪中离子化后,会带上一定量的电荷,通过检测器分析,可得到各肽段的质荷比(m/z),即一级质谱图;为获得肽段更详细的序列信息,部分肽段再次被破碎和分析...
根据法规指导原则和接受标准,通常建议内标对分析物的信号贡献不超过定量下限响应的20%,分析物对内标的信号响应不超过内标响应的5%。因此,在无干扰和交叉信号的情况下,内标浓度建议设为40%ULOQ以上;在存在可接受范围内的干扰时,则建议设为70%ULOQ以上。其次,质谱对分析物和内标的检测灵敏度也是决定内标浓度的重要因素。
LC-MS常用的检测模式包括全扫描模式、选择离子监测模式(SIM)和动态反应监测模式(DRM)等。全扫描模式通过扫描整个质量范围以寻找目标化合物的离子特征碎片。SIM模式选择特定的离子对进行监测,具有更高的灵敏度和分辨率。DRM模式实时监测反应过程中的离子流,可用于定量分析和鉴定未知化合物。根据分析需求,选择合适的检测模式...
蛋白质组质谱分析LC-MS/MS可以帮助我们研究蛋白质的结构和功能。构建序列图谱是蛋白质组质谱分析的关键步骤之一,可以通过数据库搜索法和谱库搜索法实现。构建序列图谱的意义在于确定蛋白质的序列和修饰信息,鉴定未知蛋白质,以及进行定量分析。 百泰派克生物科技——生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商 ...
构建序列图谱是蛋白质组质谱分析LC-MS/MS的关键步骤之一。下面将介绍两种常用的构建序列图谱的方法。2.1 数据库搜索法 数据库搜索法是一种常用的构建序列图谱的方法。首先,将质谱仪得到的质谱图谱与已知的蛋白质序列数据库进行比对。比对的过程中,会考虑肽段的质量、碎裂模式和修饰等信息。通过比对,可以找到与质谱...
蛋白质组质谱分析LC-MS/MS是一种结合了液相色谱(LC)和质谱(MS)的技术,用于鉴定和定量复杂样品中的蛋白质。LC-MS/MS技术的原理是将样品中的蛋白质通过液相色谱分离,并将分离后的蛋白质逐一送入质谱仪中进行质谱分析。质谱仪会将蛋白质分子分解成肽段,并通过质谱图谱的分析来鉴定蛋白质的序列和修饰。
这可以从两方面考虑,首先是在硬件条件下,因为在过去几十年中,LC-MS或者LC-MS/MS已经成为小分子样品分析的标准检测手段,作为一种混合型分析仪器,LC-MS需要满足其两个组成部分的要求,首先液相色谱部分是用来分析液态样品的,流动相从溶剂瓶中流出经过高效液相色谱泵和进样阀,再进入色谱柱这是一个很长和精细的系统,...
蛋白质组质谱分析LC-MS/MS是一种结合了液相色谱(LC)和质谱(MS)的技术,用于鉴定和定量复杂样品中的蛋白质。LC-MS/MS技术的原理是将样品中的蛋白质通过液相色谱分离,并将分离后的蛋白质逐一送入质谱仪中进行质谱分析。质谱仪会将蛋白质分子分解成肽段,并通过质谱图谱的分析来鉴定蛋白质的序列和修饰。
1 .3质谱分析 质谱(MS)是一种通过测量样品中离子的质量和相对丰度来分析化合物的技术。在LC-MS中,常用的质谱仪器包括飞行时间质谱仪(TOF-MS)、三重四极杆质谱仪(Q-TOF-MS)和离子阱质谱仪等。这些仪器可以对样品中的肽段进行质量测定,并生成质谱图谱。