5. 离心10 min(13000 rpm ,4℃),取300 μL上清液装入LC-MS进样小瓶中挥干; 6. 用400μL甲醇-水(V:V=1:4)复溶,加入内标(Lyso PC17:0,0.1 mg/mL,甲醇配置)10 μL,涡旋30 s,超声3 min; 7. -20℃下静置2小时; 8. 离心10 min(13000 rpm,4℃),取150 μL上清液装入带有支脚内衬管的LC-MS...
(1)特异性好。 LC-MS/MS方法对样本进行干扰实验的研究,通过色谱分离使干扰物质在不同的时间出峰,可以有效的消除内源性物质、同分异构体、其他代谢物的干扰,保证检测结果的准确性。(2)灵敏度高。目前主流的质谱仪器最低检测线可以达到ng/mL(10-9)水平,高端质谱仪器最低检测线可以达到1pg/mL水平,LC-M...
正离子中尽量不选择[M+Na]+,在一些化合物中[M+Na]+的响应很好,但是经二级碎裂很不稳定。选择[M+HCOO]-作为母离子时需要考察添加在流动相中甲酸对目标物的电离的影响,HPLC级、LC-MS级和不同厂家的甲酸对目标物的离子化可能会产生影响。 3.3 子离子的选择 用于MRM(多反应监测)的离子选择是基于离子丰度和特异...
● 再根据上一步确定的母离子进行PRODUCT SCAN,确保所有碎片离子都来自待测化合物,而不是溶液中的杂质,找出较强的碎片离子信息。还可改变CE,从中选定MRM需要测定的一对或更多离子对,为最后LC-MS/MS联用做准备 ●做PRODUCT SCAN时,注意小数点后的位数,MRM输入要准,灵敏度才高 ● 先多选几个离子对,待出现基质...
构建序列图谱是蛋白质组质谱分析LC-MS/MS的关键步骤之一。下面将介绍两种常用的构建序列图谱的方法。 2.1 数据库搜索法 数据库搜索法是一种常用的构建序列图谱的方法。首先,将质谱仪得到的质谱图谱与已知的蛋白质序列数据库进行比对。比对的过程中,会考虑肽段的质量、碎裂模式和修饰等信息。通过比对,可以找到与质谱图...
运用LC-MS/MS方法检测临床样本中的类固醇激素 类固醇激素,又称甾体激素,是一类四环脂肪烃化合物,具有环戊烷多氢菲母核,因其在维持生命、调节性功能、对机体发展、免疫调节、皮肤疾病治疗及生育控制方面的明确作用,临床表征中经常会作为疾病诊断的参考。因此,相关激素在临床样本中准确的定性和定量就变得尤为重要。今天...
检测方法 类固醇激素在体内含量较低、结构相似、种类繁多,所以准确定量类固醇激素对仪器的灵敏度及方法的准确度有较高的要求。2010年美国内分泌学会发表共识,推荐使用质谱来检测睾酮及其代谢物,Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism...
目的:建立并验证测定人血浆中卡马西平(CBZ)浓度的方法,并应用于CBZ的室间质评。方法:血浆样品经乙腈沉淀后,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定。内标为氯雷他定,色谱柱为Kromasi...
临床LC-MS/MS检验方法开发建立之后,用于实际临床检验之前,必须对建立的新方法进行严格、全面的验证,证明其分析性能满足临床诊断的要求。临床LC-MS/MS方法验证的内容包括方法的精密度(批内、批间)、准确度、回收率、分析测量范围、临床可报告范围、分析灵敏度、基质效应、基质特异性、干扰试验、携带效应、生物样品稳定...
LC-MS分析 LC-MS已广泛应用于分析各种基质中的小分子和大蛋白分子。这项技术的应用包括: 定量活性药物成分中的遗传毒性杂质 在呼出气中检测代表特定类别的掺杂剂(例如合成代谢剂和模拟剂)的十二种模型化合物 定量生物液体中的药物代谢产物 检测食品原料和膳食补充剂中的掺杂物...