LC-MS/MS技术适用于多种类型样本的蛋白质鉴定,主要包括重组蛋白、细菌样本、动植物组织样本。样品的处理与后续分析的准确性有关,一般通过组织破碎、蛋白质提取、酶切等步骤从原始样本中获取到包含目标蛋白质的、适合进行后续分析的样本。对于重组蛋白样本来说,要通过纯化去除样品中的杂质,并且应该将蛋白酶解为多肽片段...
一、样品处理 在进行LC-MS分析前,需要对样品进行适当的处理,以便于进入色谱柱。常见的样品处理方法包括提取、纯化、裂解和衍生化等。根据样品的性质和目标分析要求,选择合适的处理方法可以获得更好的分析效果。例如,对于复杂的生物样品,可能需要使用固相萃取技术进行样品预处理,以去除杂质和提高检测灵敏度。二、流动...
6. 离心10 min(13000 rpm,4℃),取1mL装入LC-MS进样小瓶中挥干(分三次,0.4mL、0.3mL、0.3mL); 7. 用300μL甲醇-水(V:V=1:4)复溶,加入内标(Lyso PC17:0,0.1 mg/mL,甲醇配置)10 μL,涡旋30 s,超声3 min; 8. -20℃下静置2小时; 9. 离心10 min(13000 rpm ,4℃),取150 μL上清液装入...
主页> 问答中心> 蛋白分析FAQ汇总> LC-MS/MS多肽鉴定样品要求? 1.冻干或溶液样品均可:2.最小样品量:5-50微克。避免使用洗涤剂、DMSO、甘油和其他非挥发性溶剂。将缓冲液浓度保持在最低水平,因为高盐量会干扰MS中的电离,对于含有少量盐或尿素的样品,有时也可以使用LC-ESI MS。然而,在没有洗涤剂的挥发性溶剂...
同任何其他分析方法一样,样品前处理在LC-MS分析中是重中之重的。对所用样品,无论是什么类别,都有如下要求:① 样品清洁,尽量不含杂质,由于蛋白质和肽类在ESI上有很强的响应,这两样化合物尤其要注意;② 样品不宜含有高浓度的难挥发酸(磷酸,硫酸等)及其盐,这些会引起液质联用仪很强的噪声;③ 为了防止堵塞柱...
以下是LC-MS的日常操作手册。一、准备工作:1.检查仪器状态: 在进行实验前,检查LC-MS仪器的状态,确保各个组件正常运作。2.准备溶剂: 准备适当纯度的溶剂,确保其符合分析要求。3.样品准备: 根据实验需要,准备好待测样品,并保证其溶解在适当的溶剂中。二、仪器操作步骤:1.开机: 打开LC-MS仪器的电源,等待...
EI:电子轰击源质谱,常用于GC-MS系统。 API:大气压电离源质谱,常用于LC-MS系统。 MALDI:基质辅助激光解吸电离源质谱,常用于生物大分子分析。 HPLC:高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱...
LC-MS和LC-MS/MS(或MSn)的区别是: 如果你关心的结果是你样品中的主成分,而且是你已经知道的目标物,比如质控、有机合成后看一下纯品、部分的农药全分析工作、药物合成中前导化合物的指导(合成一锅就打一针看看合成得对不对)...