LC-MS/MS技术适用于多种类型样本的蛋白质鉴定,主要包括重组蛋白、细菌样本、动植物组织样本。样品的处理与后续分析的准确性有关,一般通过组织破碎、蛋白质提取、酶切等步骤从原始样本中获取到包含目标蛋白质的、适合进行后续分析的样本。对于重组蛋白样本来说,要通过纯化去除样品中的杂质,并且应该将蛋白酶解为多肽片段...
一、样品处理 在进行LC-MS分析前,需要对样品进行适当的处理,以便于进入色谱柱。常见的样品处理方法包括提取、纯化、裂解和衍生化等。根据样品的性质和目标分析要求,选择合适的处理方法可以获得更好的分析效果。例如,对于复杂的生物样品,可能需要使用固相萃取技术进行样品预处理,以去除杂质和提高检测灵敏度。二、流动...
同任何其他分析方法一样,样品前处理在LC-MS分析中是重中之重的。对所用样品,无论是什么类别,都有如下要求:① 样品清洁,尽量不含杂质,由于蛋白质和肽类在ESI上有很强的响应,这两样化合物尤其要注意;② 样品不宜含有高浓度的难挥发酸(磷酸,硫酸等)及其盐,这些会引起液质联用仪很强的噪声;③ 为了防止堵塞柱...
1.冻干或溶液样品均可:2.最小样品量:5-50微克。避免使用洗涤剂、DMSO、甘油和其他非挥发性溶剂。将缓冲液浓度保持在最低水平,因为高盐量会干扰MS中的电离,对于含有少量盐或尿素的样品,有时也可以使用LC-ESI MS。然而,在没有洗涤剂的挥发性溶剂中,缓冲强度低,可获得最佳结果。
这可以从两方面考虑,首先是在硬件条件下,因为在过去几十年中,LC-MS或者LC-MS/MS已经成为小分子样品分析的标准检测手段,作为一种混合型分析仪器,LC-MS需要满足其两个组成部分的要求,首先液相色谱部分是用来分析液态样品的,流动相从溶剂瓶中流出经过高效液相色谱泵和进样阀,再进入色谱柱这是一个很长和精细的系统,...
以下是LC-MS的日常操作手册。一、准备工作:1.检查仪器状态: 在进行实验前,检查LC-MS仪器的状态,确保各个组件正常运作。2.准备溶剂: 准备适当纯度的溶剂,确保其符合分析要求。3.样品准备: 根据实验需要,准备好待测样品,并保证其溶解在适当的溶剂中。二、仪器操作步骤:1.开机: 打开LC-MS仪器的电源,等待...
LC-MS和LC-MS/MS(或MSn)的区别是: 如果你关心的结果是你样品中的主成分,而且是你已经知道的目标物,比如质控、有机合成后看一下纯品、部分的农药全分析工作、药物合成中前导化合物的指导(合成一锅就打一针看看合成得对不对)...
在生物分析的精密旅程中,液相质谱(LC-MS)的内标选择和应用如同导航灯,确保数据的准确性和可靠性。首先,我们要明确内标的重要性——它就像一个稳定的基准,帮助我们校正样品处理中的波动和损失。为了选择最佳的内标,我们需要遵循一些关键要求:内标类型与选择 内标大致分为两大类别:结构类似物内标和...