尤其是在质谱检测的过程中,由于基质效应会引起待测物检测信号的变化,通过向同一分析批中的所有样品中加入等量的和分析物具有相似物理化学性质的内标,并且用分析物和内标的响应值比进行定量计算,绝大多部分分析物的信号波动和量上的损失都可以得到校正,因此使用合适的内标可以极大的提高分析结果的准确度和精密度以及方法...
1 、定量校正因子:试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比,即:m i = fi’ ·Ai 绝对校正因子:比例系数f i ,单位面积对应的物质量:f i ’ =m i / Ai ;相对校正因子f i :即组分的绝对校正因子与标准物质的绝对校正因子之比。 2 、常用的几种定量方法 : ( 1 )归一化法:特点及要求:归一化法简便、准...
根据法规指导原则和接受标准,通常建议内标对分析物的信号贡献不超过定量下限响应的20%,分析物对内标的信号响应不超过内标响应的5%。因此,在无干扰和交叉信号的情况下,内标浓度建议设为40%ULOQ以上;在存在可接受范围内的干扰时,则建议设为70%ULOQ以上。其次,质谱对分析物和内标的检测灵敏度也是决定内标浓度的重要因素。
在生物样品分析过程中,内标的使用是提高分析准确度、精密度和方法可靠性的关键。内标选择通常分为结构类似物内标与同位素标记内标两大类。结构类似物内标需具备与目标分析物相同的关键化学结构和官能团,但仅在碳-氢部分存在差异,避免与分析物代谢产物相同,以免影响检测结果。同位素标记内标中,13C和15N标...
在生物分析的精密旅程中,液相质谱(LC-MS)的内标选择和应用如同导航灯,确保数据的准确性和可靠性。首先,我们要明确内标的重要性——它就像一个稳定的基准,帮助我们校正样品处理中的波动和损失。为了选择最佳的内标,我们需要遵循一些关键要求:内标类型与选择 内标大致分为两大类别:结构类似物内标和...
有几个据说是做LC/MS用的比较多的内标,地塞米松,拉贝洛尔,阿普唑仑,普萘洛尔,柳氨酚,双氯芬酸...
提取后加入法评价LC-MS方法中的基质效应流程图 提取后加入法的优缺点: 优点:可以实现基质效应的量化评价,目前各法规文件上采用的评价基质效应的方法。缺点:暂无。 看到这里,细心的小伙伴们就会有这样一个疑问:在我们日常的LC-MS分析方法中,我们大都是用内标法去定量...
LC-MS来定量分析抗体有了更多的认识,相对LBA来说,LC-MS能提供更好的定量与定性结果,且抗分析干扰能力更强,更重要的是它能提供结构信息,这对于目前火热的ADC和BsAb来说,无疑是更好的选择,LC-MS的技术特点与LBA形成互补,给抗体药物研发带来了福音。 当生物大分子如抗体被引入到...
LC-MS定量分析 LC-MS定量分析 常用方法 外标法 简便、快速 系统误差大(检测器的响应性能、柱温、流动相流速及组成、进样量、柱效等,样品前处理)内标法 克服色谱条件差异,进样量不准 合适的内标物 外标法 1 稀释 母 液 2 稀 稀 释 释 6 3 稀 稀 释 释 5稀释4 配一系列浓度标样 (6~8)内标法...
样品处理简单:LC-MS样品处理简单,只需要将样品加入仪器中即可。质量控制简单:LC-MS可以通过添加内标物质来进行质量控制,可以保证分析结果的准确性和可靠性。总之,液质联用检测是一种非常重要的分析技术,具有高灵敏度、高选择性、高准确性等优点,可以应用于生命科学、化学、环境科学等领域的化合物分析。