JC-1实验原理 实验步骤: 1、JC-1染色工作液的配制: 六孔板每孔所需JC-1染色工作液的量为1ml,其它培养器皿的JC-1染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50-100万细胞需0.5ml JC-1染色工作液。取适量JC-1,并用超纯水稀释。剧烈Vortex充分溶解并混匀JC-1。然后再加JC-1染色缓冲液,混匀后即为JC-1染色工作液。 2、阳
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细胞凋亡的早期标志之一是线粒体膜电位的下降。JC-1是一种广泛使用的荧光探针,能够检测线粒体膜电位(∆Ψm)的变化。通过观察JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变,可以反映线粒体膜电位的下降,从而作为细胞凋亡早期检测的指标。在JC-1实验中,可能会遇到一些常见问题。例如,荧光颜色的转变不明显,这可能是由于实验操作...
用线粒体膜电位法做好细胞凋亡检测的实验步骤如下：配制JC1染色工作液：配制1ml JC1染色工作液，用于每孔或每50100万细胞。确保工作液的浓度和体积准确，以保证染色效果。设置阳性对照：使用CCCP处理细胞后观察荧光变化，作为阳性对照。这有助于确认实验结果的可靠性。处理悬浮细胞：重悬与混匀：将悬浮...
掌握JC-1实验的每一步至关重要。首先，我们需要配制精确的JC-1染色工作液，为细胞提供所需的荧光环境。在阳性对照中，通过加入CCCP观察线粒体膜电位的丧失，为实验提供标准。悬浮细胞的操作流程包括细胞悬液的制备、染色、离心洗涤以及荧光观察，每一个环节都需要细心处理，以确保结果的准确性。注意事项，...
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针,表现出电势依赖性的积聚在线粒体内。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm,Em=590 nm);而凋亡细胞,线粒体跨膜电位去极化,JC-1从线粒体内释放,浓度降低,逆转为发射绿色荧光的单体形式。因此颜色的...
如下图所示:用线粒体膜电位检测试剂盒(E-CK-A301)进行检测,结果显示正常细胞存在少量凋亡,表现为出现少量线粒体膜电位崩塌细胞;CCCP处理的阳性对照几乎所有细胞线粒体膜电位崩塌;实验组细胞出现大量线粒体膜电位崩塌细胞。 图2:JC-1实验结果 ◇正常组:正常培养的Jurkat细胞 ...
线粒体膜电位是指线粒体内膜两侧的电位差,它是细胞能量代谢的关键指标之一。JC1是一种常用的线粒体膜电位检测染料,其原理是基于JC1 在不同浓度下呈现出不同的荧光颜色。JC1 有单体和多聚体两种存在状态。在低浓度时,JC1 以单体存在,此时可以检测到绿色荧光。在流式检测中,通常使用 FL-1通道(与 FITC通道)...
实验步骤如下：配制1ml JC-1染色工作液，用于每孔或每50-100万细胞。设置阳性对照，使用CCCP处理细胞后观察荧光变化。对悬浮细胞，先重悬、混匀，37℃孵育后离心洗涤，再用荧光显微镜或分析仪器检测。对贴壁细胞，建议先消化再孵育JC-1，以保证染料均匀进入。在实验过程中，要特别注意温度控制、JC-1...
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