JC-1单体和聚合物的激发光和发射光光谱参考图2。 图2. JC-1单体和聚合物的激发光和发射光光谱。 JC-1稀释和使用时有一些特殊的要求,因此对于初次使用JC-1的用户或对于JC-1的使用不是非常熟悉的用户,建议用AbMole的线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)(M10454),该试剂盒配套提供了CCCP 作为诱导线粒体膜电位下降...
(6)再用适量JC-1染色缓冲液重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。 注意:对于贴壁细胞,如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测,可以先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。 结果分析: 检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm,发射光设置为530nm;检测J...
通过组合来自绿色荧光JC-1单体(在水中的吸收/最大发射波长约为514/529nm)和红色荧光J-聚集体(可在485nm和585nm之间被激发,最大发射波长为590nm)的信号,进行各种类型的比率检测。为荧光素和四甲基罗丹明设计的滤...
这种特性是由于JC-1聚合物的可逆结构,在膜极化条件下,它的发射光由530nm(J-单体发射光)转移到590nm (JC-1聚合体发射光)。当在490nm处激发时,JC-1发生从绿色到橙绿色的可逆改变,因为线粒体膜极化的更大。这两种颜色都可以被流式细胞仪上装好的一般滤光器检测到,因此绿色发射光可以通过荧光通道1(FL1)...
JC-1线粒体膜电位荧光探针染色原理 JC-1 是一种可渗透膜的阳离子染料,用于研究细胞凋亡背景下的线粒体完整性。 jc-1结构式 它选择性地进入线粒体并随着线粒体跨膜电位(ΔΨm) 的改变而改变荧光特性。 在具有高线粒体 ΔΨm 的健康细胞中,JC-1 形成称为 J-聚集体的复合物,其发出红色/橙色荧光,并且可...
进行JC-1线粒体膜电位荧光探针染色步骤(流式细胞仪法):首先,选择合适的化合物进行凋亡诱导,细胞密度不超过1×106cells/mL。其次,取细胞悬液至无菌离心管,室温400 x g离心5 min,吸去上清,用JC-1工作液重悬细胞,于37℃,5%CO2培养箱孵育15-30 min。之后,室温离心,吸去上清,用培养液或...
a. 把配制好的JC-1染色工作液再用JC-1 Buffer(1×)稀释5倍。 b. 0.9ml 5倍稀释的JC-1染色工作液中加入0.1ml总蛋白量为10~100μg纯化的线粒体。 c. 用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测:混匀后直接用荧光分光光度计进行时间扫描,激发波长为485nm,发射波长为590nm。如果使用荧光酶标仪,激发波长不能设置...
【预期用途】用于精子线粒体染色。【染色原理】通过JC-1染料荧光颜色的变化来评估精子线粒体膜电位的状态。当精子线粒体膜电位较高时,JC-1荧光探针聚集在线粒体中形成聚合体,经488nm激光激发呈红色荧光(发射波长585/590 nm);当精子线粒体膜电位较低时,JC-1荧光探针在
重复离心和洗涤步骤,然后用新鲜培养液或缓冲液重悬细胞,即刻进行流式分析,时间就是关键。在流式定量分析中,红绿荧光的差异将揭示出健康的线粒体(FL2)与凋亡细胞(FL1)的鲜明对比。光谱探秘: JC-1的荧光调色板 JC-1的荧光特性宛如调色盘,消光系数高达195,000 cm-1 M-1,在515纳米的激发...