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7.注意补偿的调节,可以用补偿微球或者对应的FITC/PE染料抗体进行调节。 线粒体膜电位检测(左图膜电位正常为多聚体,细胞正常;中图出现膜电位开始降低,出现单体,有凋亡细胞;右图膜电位都降低了,JC-1以单体存在,都为凋亡细胞) 常见问题与解答: 1、组织样本可不可以用JC-1检测凋亡? 可以,但无法直接检测组织,可先...
细胞凋亡的特点是细胞特征的改变,包括DNA降解、线粒体膜电位下降、细胞膜上脂质的不对称分布被破坏。这些变化都可以利用对其具有敏感性和特异性的染料和试剂,通过流式细胞仪检测。 JC-1染料测定线粒体膜电位 JC-1是测定因细胞凋亡或正常细胞受到外在压力导致线粒体膜电位改变的重要指示剂。在正常的细胞中,JC-1聚集...
在低浓度时,JC-1以单体形式存在,可以检测到绿色荧光,通常用FL-1通道(与FITC同通道)进行流式检测。在高浓度时,JC-1以多聚体形式存在,可以检测到红光,通常用FL-2通道(与PE同通道)进行流式检测。由于JC-1浓度的变化,它在单体和多聚体之间形成一个可逆的转变过程。在正常细胞中,当膜电位正常时,JC-1通过线粒...
JC-1是一种荧光探针,可通过荧光变色来反映线粒体膜电位的变化。在正常的线粒体膜电位条件下,JC-1会聚集在线粒体内部形成聚集态(红色荧光信号),而在线粒体膜电位降低时,JC-1会从线粒体释放出来形成分散态(绿色荧光信号)。使用流式细胞术,可以通过检测细胞中JC-1的荧光信号来定量分析细胞内线粒体膜电位的变化...
在线粒体膜电位正常的情况下,JC-1呈现聚集态,形成红色荧光;而在线粒体膜电位丧失或降低时,JC-1分散,形成绿色荧光。这一性质使得JC-1可以用来评估细胞的线粒体功能。 流式细胞仪是一种广泛用于单个细胞分析的仪器。通过使用适当的激光和荧光检测器,流式细胞仪可以同时分析成千上万个细胞的多个参数,包括细胞大小...
正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光;而在凋亡细胞中,线粒体跨膜电位去极化,JC-1从线粒体内释放,浓度降低,逆转为发射绿色荧光的单体形式。因此颜色的变化将直接反映出线粒体膜电位的变化。 图3:JC-1检测荧光与流式结果示意图(图片源自科学网)...
问题：贴壁细胞能否直接使用JC-1在6孔板染色后，再用胰酶消化上流式？解决方案：不建议直接在6孔板染色后使用胰酶消化上流式，因为细胞之间的相互接触可能影响染料的均匀性，尤其是在细胞密度较高时。推荐在消化细胞后再孵育JC-1。问题：石蜡切片和冰冻切片是否适用JC-1实验？解决方案：JC-1实验仅适用于...
JC-1有单体和多聚体两种存在状态,在低浓度时以单体的形式存在,高浓度时以多聚体形式存在,两者的发射光谱不同,但均可在流式细胞仪绿色(FL-1)通道检测出绿色荧光,JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,正常健康线粒体的膜电位(△ψ)具有极性,JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线...
根据原理我们进行结果解读：从提供的两张JC-1线粒体膜电位流式图可以看出，模型组（上图）的荧光位置...