五、结果分析 检测JC-1单体时可以把激发光设置为490 nm,发射光设置为530 nm;检测JC-1聚合物时,可以把激发光设置为525nm,发射光设置为590 nm。用流式细胞仪检测细胞凋亡的情况,绿色荧光通过FL-1通道检测,红色荧光通过FL-2通道检测。FL-1+,FL-2+为正常细胞,FL-1+,FL-2-为凋亡细胞。 注:图片来源为中国流...
JC-1是一种荧光探针,可通过荧光变色来反映线粒体膜电位的变化。在正常的线粒体膜电位条件下,JC-1会聚集在线粒体内部形成聚集态(红色荧光信号),而在线粒体膜电位降低时,JC-1会从线粒体释放出来形成分散态(绿色荧光信号)。使用流式细胞术,可以通过检测细胞中JC-1的荧光信号来定量分析细胞内线粒体膜电位的变化...
在高浓度时,JC-1以多聚体形式存在,可以检测到红光,通常用FL-2通道(与PE同通道)进行流式检测。由于JC-1浓度的变化,它在单体和多聚体之间形成一个可逆的转变过程。在正常细胞中,当膜电位正常时,JC-1通过线粒体膜极性进入线粒体内,并因浓度升高而形成发射红色荧光的多聚体。然而,在凋亡细胞中,线粒体跨膜电...
根据原理我们进行结果解读:从提供的两张JC-1线粒体膜电位流式图可以看出,模型组(上图)的荧光位置...
解决方案:JC-1实验仅适用于活细胞样本,因此石蜡切片和冰冻切片不适用于该实验。问题:JC-1孵育完成后能否先固定再检测?解决方案:不建议固定后再检测,因为固定会导致细胞死亡,影响检测结果的准确性。此外,染色后的样本放置过久会导致荧光淬灭,建议染色30分钟内完成检测。
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)使用说明 货号:M8650 规格:100T 内容:产品名称包装 JC-1(200×)100µL/管,共5管 超纯90mL JC-1染缓冲液(5×)80mL CCCP(10mM)20µL 保存条件:-20℃避光保存,尽量避免反复冻融,有效期一年。超纯水和JC-1染色缓冲液(5×)也可4℃保存。产品简介:线粒体...
JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,正常健康线粒体的膜电位(△ψ)具有极性,JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体,多聚体发射光为红色荧光;可被流式细胞仪的红色(FL-2)通道检测到,而细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度...
结合缓冲液洗涤(1x5分钟) [可选]固定细胞并破膜(30分钟) [可选]用荧光标记抗体染色细胞内抗原(30分钟) 流式细胞仪分析细胞 一般注释 FVD eFluor™450不建议与Annexin V细胞凋亡检测试剂盒同时使用。 由于Annexin V与PS的反应具有钙依赖性,因此在Annexin V检测过程中,避免使用含EDTA或...
jc1线粒体膜电位流式.docx,jc1线粒体膜电位流式 线粒体是细胞内的一个重要器官,它在能量供应和调控细胞代谢方面起着至关重要的作用。而线粒体膜电位则是线粒体正常功能的关键因素之一。 线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,简称ΔΨm)是线粒体内外膜之间的
4.流式细胞仪分析:使用流式细胞仪检测细胞的红色和绿色荧光,通过设置合适的激发和发射波长(通常是488nm激发和525nm/590nm发射)来分析JC-1的荧光信号。 5.结果分析:根据红色和绿色荧光的强度比值,评估线粒体膜电位的变化。线粒体去极化的细胞会显示较低的红色/绿色荧光比值。 实验中的关键点和注意事项 1.在实验...