通过测定JC-1的荧光强度比值,可以反映线粒体膜电位的高低。 具体实验步骤如下: 1.将细胞或组织块离心,去除上清液,用PBS洗涤一遍,离心。 2.将细胞或组织块加入含有1μM的JC-1的PBS缓冲液中,室温下孵育30分钟。 3.离心洗涤一遍,去除上清液。 4.将细胞或组织块加入含有PBS缓冲液的离心管中,用流式细胞仪或荧光...
荧光的多聚体,而凋亡细胞,线粒体跨膜电位去J化,JC-1从线粒体内释放,浓度降低,逆转为 发射绿色荧光的单体形式。故而可以通过检测绿色和红色荧光来定性(细胞群的偏移)定量(细 胞群的荧光强度)的检测线粒体膜电位的变化。近年来研究发现线粒体功能状态和不少疾病的密切相关,多种细胞在不同因子作用下发生...
JC-1是一种理想的用于检测线粒体膜电位的荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。其原理是,当线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体基质中,形成聚合物,488nm激发时的最大发射波长为590nm,可以产生红色荧光,在流式上表现为FL1和FL2双阳性;当线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体基质中,...
对线粒体有高度亲和性 流式细胞分析的参考方案 JC-1 染色试剂可用作多种样本包括肌细胞、神经元细胞)以及完整组织和离体线粒体的线粒体电位的指示剂。 绿色与红色荧光的比例仅取决于线粒体膜电位,与线粒体大小、形状和密度等可能影响荧光...
对线粒体有高度亲和性 流式细胞分析的参考方案 JC-1 染色试剂可用作多种样本包括肌细胞、神经元细胞)以及完整组织和离体线粒体的线粒体电位的指示剂。 绿色与红色荧光的比例仅取决于线粒体膜电位,与线粒体大小、...
这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。 线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降,同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一...
检测原理 JC-1的工作原理基于其在不同线粒体膜电位状态下的荧光特性变化。在高线粒体膜电位的情况下,JC-1以聚合物的形式存在,发出红色荧光;而在低线粒体膜电位的情况下,JC-1以单体的形式存在,发出绿色荧光。通过监测红绿荧光的比例变化,可以评估线粒体的状态,从而判断细胞的健康程度或是否处于凋亡过程中。
1. 引言 线粒体是细胞内的重要细胞器,除了参与细胞能量代谢和调控外,线粒体膜电位(ΔΨm)的维持也对细胞功能和生存至关重要。因此,研究和测量细胞内的线粒体膜电位具有重要的意义。 2. JC-1/线粒体膜电位流式检测方法的原理 JC-1是一种双重荧光探针,具有两个结构相似但荧光特性不同的形式:JC-1聚集型(ag...