► 实验后续分析 在进行IP实验后,蛋白质样本需进行进一步分析,包括蛋白质印迹和质谱分析,以支持蛋白质组学研究。蛋白质印迹通过对特定蛋白质进行检测,揭示其表达量和是否存在;而质谱分析则进一步鉴定蛋白质组份,提供更详细的蛋白质组成信息。这些分析方法不仅可以验证实验结果,还可以揭示蛋白质的功能和相互作用网络。通过这些步骤和分析方法,研究者能够更深入地探索蛋...
免疫共沉淀(Immunoprecipitation, IP)后的质谱分析是一种强大的组合技术,用于鉴定蛋白质复合物中的成分和研究蛋白质间的相互作用。这种方法首先使用特异性抗体捕获目标蛋白质及其潜在的相互作用伙伴,然后通过质谱(MS)分析这些被共沉淀的蛋白质,以鉴定它们的身份和可能的修饰状态。以下是该过程的基本步骤和要点: 一、IP...
3.在4℃下以20000g离心20分钟,将上清液转移到新的微量离心管中,并用0.22um的滤膜过滤(IP样品一般...
百泰派克生物结合MALDI-TOF质谱系统与LC-MS/MS质谱系统,提供专业准确的蛋白胶点、胶条、IP样品,CO-IP样品蛋白鉴定服务。可鉴定的样品包括:1D-SDS PAGE分离的蛋白胶条,2DE PAGE中的蛋白胶点,蛋白表达产物,免疫共沉淀(Co-IP)样品。其中,蛋白质样品的鉴定前处理过程严格按照Nature Methods发表的文章:Universal sample...
在免疫沉淀串联质谱(IP-MS)实验过程中,质谱检测环节对于实验组和对照组是一致的,其差异主要体现在IP实验环节,在进行Co-IP后做质谱实验分组的设计时,重点需要明确IP环节中的实验阳性对照和阴性对照。 对照组的设置是最关键的环节之一,控制变量是对照组设置的重要原则,在IP-MS实验设计中亦是如此。阳性对照的目的是证...
免疫沉淀串联质谱分析(IP-MS)原理介绍: 蛋白质相互作用(Protein-Protein Interactions, PPIs)和翻译后修饰(Post-Translational Modifications, PTMs)的数据是能显著提高基础类研究文章档次的必备内容。筛选和发现目的蛋白(target)在细胞中新的互作蛋白或者新的后修饰,免疫沉淀(IP,Immunoprecipitation)结合LC-MS(液相色谱-质...