X-gal AND IPTGELSEVIERMolecular Biology
X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物,水解后呈蓝色。基于这个特点,pUC系列载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出...
称取0.2克X-gal,加入10ml二甲基甲酰胺(DMF),溶解后保存于一小血清瓶内,装有X-gal溶液的血清瓶须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏,并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。 3、IPTG-X-gal平板制备:在含氨苄或卡那抗生素平板上,滴加40 µL的X-...
X-Gal的作用机理及IPTG-X-gal片剂的生产方法实验注意事项 1.培养噬菌体时，在顶级琼脂中的添加量为：50μl/ 3 ml（20mg / ml）。2.含X-Gal的培养基应在4℃的黑暗环境中保存，必须在1-2周内使用。3.为便于实验操作，还可以根据细菌溶液的体积和板数来计算X-gal和IPTG储备溶液的浓度，并直接添加到准备用...
X-Gal的作用机理及IPTG-X-gal片剂的生产方法实验简介 X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解成蓝色，因此常用于转基因筛选测试，例如蓝点和白点筛选或β-半乳糖苷酶原位染色检测实验，在蓝点和白点测试中，可以根据菌落的颜色简单地选择转化子。X-Gal是β-半乳糖苷酶的底物，水解后呈蓝色。基于此功能，当以lacZ缺陷...
其原理是:pUC质粒含Ampr,可供菌落筛选,质粒载体带有大肠杆菌乳糖操纵子的lacZ’基因,该基因含一段编码β-半乳糖苷酶氨基末端145个氨基酸α-肽的DNA片断,IPTG可诱导此片断合成,此片断能与宿主细胞所编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内α-互补,形成完整的β-半乳糖苷酶。该酶能催化无色底物X-gal生成半乳糖和深...
首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100 ml的琼脂培养基中，加入200μl的上述溶液、100μl的IPTG（24 mg/ml）和100μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化至lacZ缺失...
细菌蓝白斑筛选原理:IPTG为安慰型诱导物,可诱导β-半乳糖苷酶的产生,X-gal是β-半乳糖苷酶的作用底物,在β-半乳糖苷酶的作用下X-gal被切割成半乳糖...
2、X-gal储液配置:用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液。称取0.2克X-gal,加入10ml二甲基甲酰胺(DMF),溶解后保存于一小血清瓶内,装有X-gal溶液的血清瓶须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏,并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。
X-Gal的作用机理及IPTG-X-gal片剂的生产方法实验步骤 1.首先将X-Gal制成20 mg / ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（在-20°C下黑暗保存），然后将200μl的上述溶液和100μl的上述溶液添加到100 ml琼脂培养基IPTG中（24 mg / ml）和100μlAmp（100 mg / ml）制成X-Gal，IPTG，Amp平板培养基，将DNA片段...