1.培养噬菌体时，在顶级琼脂中的添加量为：50μl/ 3 ml（20mg / ml）。2.含X-Gal的培养基应在4℃的黑暗环境中保存，必须在1-2周内使用。3.为便于实验操作，还可以根据细菌溶液的体积和板数来计算X-gal和IPTG储备溶液的浓度，并直接添加到准备用于包被的细菌培养液中。盘子。涂层平坦，因此可以节省测试时间...
然 后在 100 ml 的琼脂培养基中,加入 100 μl 的上述溶液、200 μl 的 X-Gal(20 mg/ml 的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和 100 μl 的 Amp(100 mg/ml),制作成 IPTG、 X-Gal、Amp 平板培养基。 当DNA 片段插入至 pUC 系列载体(或其他带有 lacZ、Amp 基因载体),然后转化 至 lacZ 缺失细胞中后,涂布...
X-Gal的作用机理及IPTG-X-gal片剂的生产方法实验步骤 1.首先将X-Gal制成20 mg / ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（在-20°C下黑暗保存），然后将200μl的上述溶液和100μl的上述溶液添加到100 ml琼脂培养基IPTG中（24 mg / ml）和100μlAmp（100 mg / ml）制成X-Gal，IPTG，Amp平板培养基，将DNA片段插...
蓝白斑筛选减轻了在筛选阳性克隆菌落时的工作量。 使用浓度:IPTG浓度:50mg/ml;X-gal浓度:20mg/ml 直接涂板法:取IPTG溶液10l,X-gal溶液20l滴在培养基上,同时滴加50～100l无菌水或无菌LB,用涂布棒涂抹均匀,放至表面无水后即可使用。 预制板:倒板时,在温度降至50℃后。每100mlLB中加入250l的IPTG溶液和500?
IPTG浓度:50mg/ml;X-gal浓度:20mg/ml 直接涂板法: 取IPTG溶液10l,X-gal溶液20l滴在培养基上,同时滴加50～100l无菌水或无菌LB,用涂布棒涂抹均匀,放至表面无水后即可使用。 预制板: 倒板时,在温度降至50℃后。每100mlLB中加入250l的IPTG溶液和500?l的X-gal溶液,混匀后制板即可。
在含有X—gal和IPTG物质的培养基上,大肠杆菌质粒上的lacZ‘基因如表达出产物β—半乳糖苷酶,则能使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒
X-gal 溶液(2%,m/V )2. 培养基含有适当抗菌素的 LB 或 YT 琼脂板LB 或 YT 顶层琼脂3. 专用设备可调至 45℃ 的恒温块木制牙签或接种环4. 载体和菌种重组质粒转化的 E.coli。二、方法1. 将溶化的顶层琼脂分装于 17X100 mm 试管,将试管置于 45℃ 的加热块槽内备用。90 mm 培养板用 3 ml 顶层琼脂...
IPTG是为了诱导乳糖分解相关酶的编码基因表达，使得培养基中的乳糖得以被分解产生半乳糖。X-gal一种酵母半乳糖苷酶显色底物，可以与分解产生的半乳糖结合生成蓝色物质，用于蓝白斑筛选。
首先把IPTG配制成24mg/ml(100mM)的水溶液,并进行过滤除菌后保存。然后在100ml的琼脂培养基中,加入100μl的上述溶液、200μl的X-Gal(20mg/ml的二甲基甲酰胺(..
一般是配好的amp+LB板，涂板的时候把x-gal 40ul（20mg/ml）,IPTG 4ul（200mg/ml）加入到菌液里，然后混匀涂板。也可以先涂到板上在涂菌。配培养基的时候，一般不直接加x-gal，IPTG，确实存在浪费问题，因为菌只在平板表面长。