将mRNA与LNP组分（可电离的阳离子脂质、聚乙二醇PEG脂质、甾醇和磷酸胆碱）组合反应，发现仅在含有可电离脂质的制剂组分中可检测LP组分，并且不受其他脂质存在的影响。从mRNA-可电离脂质二元组合中提取到的mRNA与mRNA-LNP中提取出的mRNA具有相同的IP-RP HPLC 色谱图，说明在二元简化系统中发生了与LNP中相同的化学反应。
他们通过反相离子对高效液相色谱(IP-RP HPLC)鉴定出脂质与mRNA发生加合反应生成的一类杂质,这种杂质通过常规mRNA分析手段无法检测到,由源自可电离阳离子脂质的降解成分添加到碱基或者核糖上引起。
由于加合脂质的大小疏水性不同,mRNA-脂质加合物在IP-RP HPLC 色谱图上呈现出不同的保留时间。将七个不同批次的相同可电离脂质与mRNA进行混合制备,在IP-RP HPLC 色谱图上不同批次的LP丰度存在差异,这说明加合反应可能是由可电离脂质的杂质驱动的,而不是脂质本身的化学反应性。通过高反应性可电离脂质,了解完整加...
由于加合脂质的大小疏水性不同,mRNA-脂质加合物在IP-RP HPLC 色谱图上呈现出不同的保留时间。将七个不同批次的相同可电离脂质与mRNA进行混合制备,在IP-RP HPLC 色谱图上不同批次的LP丰度存在差异,这说明加合反应可能是由可电离脂质的杂质驱动的,而不是脂质本身的化学反应性。通过高反应性可电离脂质,了解完整加...
这种脂质-mRNA加合物无法采用毛细管电泳(CE)鉴定,但是,在IP-RP HPLC色谱图上表现为独特的晚洗脱峰(LP),与mRNA主峰形成鲜明对比。这项研究找到了之前被忽略的一项非常重要的质量监控参数:脂质-mRNA加合物含量。 必须通过原材料控制、制造工艺参数、配方设计和 LNP 储存条件来减轻脂质-mRNA加合物反应的发生。同时,也...
IP-RP-HPLC目的建立离子对反相高效液相色谱(IP-RP-HPLC)法同时测定感冒清片(南板蓝根,大青叶,对乙酰氨基酚等)中3种成分的含有量.方法该药物25%甲醇提取物的分析采用Waters XTerra C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长...
图5.合成21-mer寡聚核苷酸的HPLC纯化.样品浓度2.8 nmol/µL,柱上 载样量范围1.4~140 nmol. * 表中所列为近似值,具体因寡聚核苷酸的⻓度,碱基组成和所⽤的"中⼼切割"馏分收 集⽅法⽽异. 表1.去三苯甲基寡核苷酸纯化时所⽤的XBridge OST C18⾊谱柱选择指南. 6) 如何制备专⽤的IP-RP...
RP-IP-HPLCflavoxatehydrochlorideTo establish a method of RP-IP-HPLC determination for flavoxate hydrochloride tablets.Methods:Employed Shim-Pack vp-ODS column (4.6 mm×150 mm,5 μm), 0.05 mol· L-1 KH2PO4(containing 1% triethylamine adjusted to pH 3.8 with phosphoric acid)-0.002 5 mol·...
A reverse-phase ion-pair HPLC for the quantitative determination of ceftriaxone was developed. The column(3.9mm×150mm)was packed with Nova-Pak C8(5μm ).The mobile phase was acetonitrile-buffer solution(Dissolve 3.4g of tetrabutylammonium bromide in 500ml water,add 74ml of pH7.0\nphosphate ...
左卡尼汀为酸碱两性药物,极性很大,在 C18 柱上无法被保留,所以采用反相 HPLC 对其进行定 量分析是不可能的。本例介绍左卡尼汀的离子对反相高效液相色谱测定法。 色谱条件:色谱柱为 C18 Hypersil,250mm×4.6mm,5 m m;以 0.05mol/L 磷酸盐缓冲液(PH 为 2.0,含 1‰庚烷磺酸钠)—甲醇(98:2)为流动相,流速 1...