IP是使用特异性抗体进行免疫沉淀的样品，用于检测目标蛋白及其相互作用蛋白。通常在IgG之后上样，作为实验组
一般不需要将IgG管拿去测序，因为阴性对照没必要进行测序。在ChIP-qPCR或ChIP-荧光定量PCR中需要设置IgG对...
根据结果图信息，首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用；并且二者都没有带标签，因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体；然后Input组为阳性对照，IgG为IP组的阴性对照，anti-FOXP1是IP的实验组，即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示，Iuput组中均检测到了B...
假设你IP的抗体是兔抗的,目的蛋白进行WB的抗体也是兔抗的,而且目的蛋白的分子量为55KD,可以想象,55KD的位置除了你的目的蛋白以外,还有IP抗体的重链IgG。由于IP的抗体用量非常大(1ug),就导致55KD处的信号会非常强。如果你用抗兔的二抗进行显色,那么55KD...
Input:全细胞裂解液,含有细胞内所有的蛋白,可认为是阳性组。也就是处理完样本得到的细胞裂解液,在做IP实验之前,需要先跑WB,确认样本中含有蛋白A和蛋白B; Anti-A:A蛋白的免疫共沉淀抗体; IgG:Anti-A的同型对照抗体,即跟Anti-A同来源同种型,如Anti-A是兔来源IgG型,则同型对照抗体需要选择Rabbit IgG(abs20035...
3) WB 抗体:IP 捕获抗体 (如鼠源) 与 WB 检测一抗 (如兔源) 选用不同种属 来源的抗体 (初级方案); 特殊二抗:传统二抗可识别变性的重轻链,而 Protein A/G-HRP 二抗仅结合完整的IgG。 18-160 | Protein A, HRP conjugate 18-161 | Protein G, HRP conjugate ...
3️⃣ IgG阴性对照:在Co-IP实验中,通常会向磁珠中添加IgG作为阴性对照。IgG不会与任何蛋白质结合,因此可以作为对照来确定实验结果的有效性。通过比较实验组和IgG对照组的结果,可以排除非特异性结合的影响。 4️⃣ IB步骤:IB即Western blot,用于检测Co-IP实验中沉淀下来的蛋白质。通过WB可以确定目标蛋白及其...
(bp) D IP:AR IP:ETS1 IP:IgG input +E +R +E +R +E +R +E +R WB:AR 105kDa E dapi ETS1 AR merge - ETS1 - R1881 + ETS1 - R1881 - ETS1 + R1881 no co- >200bp adjacent occurrence F Cos7 AR reporter assay 300 250 200 150 100 50 0 R1881 - + -+ -+ -+ -+ ...
(在excel中可以使用公式=POWER(2,Input-IP/IgG)*1/20*100进行计算) (3)计算Fold enrichment:Fold enrichment=%(IP/Input)/%(IgG/Input) 即实验组Fold enrichment=92681.90,对照组Fold enrichment=256749.15; (4)计算实验组/对照组:实验组Fold enrichment/对照组Fold enrichment=0.36098。
IPIPInputIgG Suz12WB:InputIgG Suz12WB:75 kDaSuz1275 kDaSuz1235 kDaSnail1-HA35 kDaSnail1-HAIPIPInputIgG HAWB:InputIgGSnail1WB:85 kDaEzh285 kDaEzh235 kDaSnail1-HA32 kDaSnail1Snail 1Snail1InputWT)(P2A)Cont"9?NUmNPNmNPNmNPNWB:75 kDaSuz1235 kDaSnail1-HA 相关知识点: 试题来源: ...