4、 Co-IP 实验中如何去除重链轻链的影响? IP检测产生轻重链原因:靶标蛋白与抗体重链 (55kD) 、轻链(25kD)分子量差别很大。 完整抗体=2条重链(~55KD/重链)+2条轻链(~25KD/轻链),抗体变性后,就会产生一个55KD的重链蛋白,1个25KD的轻链蛋白,WB检测IP的样本时,由于二抗也识别结合一抗的轻重链,导致WB曝光...
1)靶标蛋白与抗体重链 (55kD) 、轻链(25kD)分子量差别很大; 2) IP抗体 :将IP抗体固定于磁珠上 (PureProteome NHS磁珠目录号LSKMAGN04); 3) WB 抗体:IP 捕获抗体 (如鼠源) 与 WB 检测一抗 (如兔源) 选用不同种属 来源的抗体 (初级方案); 特殊二抗:传统二抗可识别变性的重轻链,而 Protein A/G-HRP...
选择同一种源的抗体的问题在于:在WB之前进行的蛋白变性这一步,由于加样缓冲液中含有巯基乙醇,巯基乙醇会把抗体的重链和轻链之间的二硫键破坏,从而使的抗体变成重链分子55KD和轻链分子25KD。假设你IP的抗体是兔抗的,目的蛋白进行WB的抗体也是兔抗的,而且目的...
在COIP中,IP地址被用作节点之间进行通信和数据同步的唯一标识符。 什么是input? 在COIP中,input是数据流的源头。它负责向集群中的其他节点提供数据。 input可以是一个文件、一个流媒体服务器、一个数据库或其他数据源。数据流从input流向集群的其他节点。 如果input出现故障或无法提供数据,则集群将停止正常工作。 什...
input是用来对照的,看看你的蛋白到底表达了没有.
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 实验原理:当细胞在非变性条件下被裂…
做CO-IP跑出来的input和珠子条带位置不平齐,这是为什么呀?求解,求助 发自小木虫Android客户端 ...
co-IP里的input的意思? 1 个回复 | 最后更新于 2014-10-26 汉恒-杨燕 2014-10-27 # 1 input是表征你每个样本的起始值一样的, 防止co-ip的结果是由于初始值不一致引起的, 具体的操作就是直接拿蛋白样本跑WB。 登录后方可回帖 登录 忘记密码 微信账号登录 现在注册 我要提问我来回答 标签广场 查看...
增加上样量,还不行的话把input组的膜剪下来单独曝光。就是楼里小伙伴说的问题,coip富集蛋白,曝光时间对于input来说太短了 赞 回应 豆友k-0Nbx8Bdw 2022-06-12 23:11:25 增加上样量,还不行的话把input组的膜剪下来单独曝光。就是楼里小伙伴说的问题,coip富集蛋白, ... 叉烧盖面 好滴,我下次试试...
不可以。根据查询相关公开信息显示,CoIP实验是必须设置一个阳性对照组即Input组的,目的是为了验证细胞裂解液中蛋白X比Y的存在。免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。